发明名称 | 蛋白酶 | ||
摘要 | 本发明公开了一种蛋白酶。所述蛋白酶的核心蛋白序列为SEQ ID NO :1所示;其底物的特异性序列为ELXGXR(其中X为任意一种必需氨基酸),切割位置在第二和第三个氨基酸残基之间;酶切反应的最适温度在35-40℃之间,65℃时,仍有活性。本发明中涉及的蛋白酶酶切序列特异性高,耐热性较好。 | ||
申请公布号 | CN104212783B | 申请公布日期 | 2016.03.02 |
申请号 | CN201410272769.9 | 申请日期 | 2014.06.19 |
申请人 | 浙江大学 | 发明人 | 华跃进;王云光;王梁燕 |
分类号 | C12N9/52(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N | 主分类号 | C12N9/52(2006.01)I |
代理机构 | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人 | 林松海 |
主权项 | 一种蛋白酶酶切底物的方法, 其特征在于:所述的蛋白酶具有锌指‑蛋白酶结构域、螺旋‑转角‑螺旋结构域和GAF结构域,所述的蛋白酶全酶和其独立结构锌指‑蛋白酶结构域具有同等的蛋白酶活性;所述锌指‑蛋白酶结构域的核心蛋白序列如SEQ ID NO :1所示;所述蛋白酶酶切底物的方法,采用的底物之一为保藏号为ATCC No.13939的耐辐射奇球菌(<i>Deinococcus</i><i> radiodurans</i>)的转录因子DdrO,所述的DdrO的Gene ID: 1798752; NP_296294.1;所述蛋白酶的底物酶切特异性序列是ELXGXR ,其中X为任意一种必需氨基酸,切割位置在第二和第三个氨基酸残基之间;所述蛋白酶酶切底物的方法,采用含100‑200 mM NaCl、10‑50 mM Tris‑HCl 8.0、1mM DTT、2.0‑5.0 mM MnCl<sub>2</sub>的反应缓冲液;采用的温度范围为35‑40℃;所述的蛋白酶来源于耐辐射奇球菌。 | ||
地址 | 310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号 |