多糖多酚植物基因组的提取方法

摘要

本发明属于分子生物学技术领域，公开了一种多糖多酚植物基因组的提取方法，步骤为：取植物材料研磨后加入核酸分离缓冲液和2-巯基乙醇，混匀后置水浴中；离心机中离心后弃上清；加入1×PBS溶液，研磨仪上震荡混匀，离心后弃上清；向沉淀中加入预热的3×CTAB裂解液并混匀，水浴裂解；加等体积酚/氯仿/异戊醇混合液，混匀，离心；取上清，加入等体积氯仿/异戊醇混合液，混匀，离心；取上清，加入NaCl和冰异丙醇，混匀，沉淀1～3小时；取出离心后，将沉淀用乙醇洗涤，风干后加TE溶解，即完成提取。本发明能有效去除多糖多酚，减少糖和酚类物质对核酸提取的影响，提高DNA的质量和浓度。

主权项

一种多糖多酚植物基因组的提取方法，其特征在于，包含下述步骤：(1)取待提取植物材料，研磨后加入核酸分离缓冲液和2‑巯基乙醇，并使所述2‑巯基乙醇的终浓度为1％～5％，震荡混匀后，置于75～95度水浴中5～30分钟；(2)从水浴中取出，离心机中离心，弃掉上清液；(3)加入1×PBS溶液，研磨仪上震荡混匀，离心，弃上清；(4)向沉淀中加入500～1000ul预热的3×CTAB裂解液并混匀，65度水浴裂解30～60分钟；(5)加等体积的酚/氯仿/异戊醇混合液，混匀，离心；(6)取上清，加入等体积的氯仿/异戊醇混合液，混匀，离心；(7)取上清，加入NaCl和冰异丙醇，上下颠倒混匀，在‑20～‑80度环境下沉淀1～3小时；(8)取出，离心后，将沉淀用乙醇洗涤，风干后加TE溶解，即得到所提取的基因组。