一种单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法

摘要

单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法。涉及一种核酸适体筛选技术，建立快速、高效的单克隆表面展示核酸适体筛选新方法。所述方法包括如下步骤：（1）将氨基修饰的正向引物通过NHS-氨基反应偶联到NHS修饰的微球表面；（2）将寡核苷酸文库通过液滴单分子微乳PCR以单克隆的形式扩增到偶联有正向引物的微球表面，每个微球上仅展示一种核酸序列；（3）通过单克隆微球库与靶标相关作用，可视化地考察表面展示序列与靶标的结合程度；（4）直接挑选获得能和靶标分子结合的单克隆微球，获取微球上的DNA序列，即可获得高质量核酸适体。该方法快速、高效、经济，实现了分子识别可视化监测，并可在无需克隆、测序、合成的条件下实现了富集库中核酸适体的快速筛选，获得选择性好、亲和力强的核酸适体。

主权项

一种单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法，将DNA文库单克隆展示于微球表面，实现分子识别可视化监测；所述方法包括如下步骤：(1)将氨基修饰的正向引物通过NHS‑氨基反应偶联到NHS修饰的微球表面；(2)将寡核苷酸文库通过液滴单分子微乳PCR以单克隆的形式扩增到偶联有正向引物的微球表面，每个微球上仅展示一种核酸序列；(3)通过单克隆微球库与靶标相关作用，可视化地考察表面展示序列与靶标的结合程度；(4)直接挑选获得能和靶标分子结合的单克隆微球，获取微球上的DNA序列，获得高质量核酸适体。