一种猪流行性腹泻病毒逆转录环介导等温扩增试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒的可视化逆转录环介导等温扩增试剂盒及其应用，该试剂盒包括RT-LAMP引物、2×反应缓冲液、EM、荧光目视检测试剂、超纯水和猪流行性腹泻病毒RNA模板；所述的RT-LAMP引物包括外引物F3与B3、内引物FIP与BIP和环引物LF与LB，其应用包括使用该试剂盒检测猪流行性腹泻病变组织和带毒粪便。特异性检测和敏感性检测证实，本发明提供的逆转录环介导等温扩增试剂盒可实时监测反应并且定量检测出猪流行性腹泻病毒的拷贝数，快速准确的获得检测结果，为简便、快速和可靠的检测猪流行性腹泻病毒带来便利。

主权项

一种猪流行性腹泻病毒逆转录环介导等温扩增试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括RT‑LAMP引物、2×反应缓冲液、EM、荧光目视检测试剂、超纯水和猪流行性腹泻病毒RNA模板；所述的RT‑LAMP引物包括外引物F3（SEQ ID NO：1）与B3（SEQ ID NO：2）、内引物FIP（SEQ ID NO：3）与BIP（SEQ ID NO：4）和环引物LF（SEQ ID NO：5）与LB（SEQ ID NO：6）； 其中：F3   CCGACAGGTCTGCATTCCB3   CCGGACATAGAAGGCCCAAFIP  CCTGTACGCCAGTAGCAACCTTGAGCACCAACTGGTGTAACGBIP  TTCGTCACAGTCGCCAAGGCCCAGTGCCAGATGAAGCATLF  CAAGCAATGTACCACTAAGGAGTLB  AACAATTGTCTACGGACGTGTT；所述的2×反应缓冲液是Tris‑HCL、KCL、MgSO₄、(NH₄)₂SO₄、Tween20、Betaine和dNTPs。