一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法

摘要

本发明公开的一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，是以杉木优良无性系当年生嫩枝为外植体，通过灭菌消毒组培获取繁殖芽，将繁殖芽接种于包括1/2MS，6-BA1.0mg/L和IBA0.5mg/L的增殖培养基内诱导丛生芽发生，选择繁殖芽基部萌发、生长健壮的继代芽扦插于常用的生根培养基上，炼苗，移栽，杉木苗高15～30cm时出圃造林。使用本方法，杉木继代芽增殖系数高，达4～6，繁殖速度快、育苗量大、可以在短期内批量生产遗传稳定性高、组培苗正冠率100%，生根率高达96%以上的组培继代芽，能适应我国杉木储备基地建设发展对良种种苗的需要，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

主权项

一种杉木正冠组培苗继代芽培育方法，其特征在于：包括获取外植体、继代芽增殖培养、生根苗培养、生根苗移栽和出圃工序，通过获取消毒灭菌后的外植体，依次接种于初始培养基和增殖培养基后获得正冠组培苗，对正冠组培苗进行不定根诱导生根后移栽，出圃，具体操作步骤如下：（1）获取外植体：选择优良的无性系嫁接杉木幼树当年生的嫩枝为外植体；将消毒灭菌后的外植体接种到初始培养基内，获取繁殖芽；所述的初始培养基是以2/3MS为基本培养基，添加6‑BA1.0mg/L、IBA0.5mg/L和ZT0.2mg/L；其中2/3MS基本培养基中的Ca(NO₃)₂含量为150mg/L，Na₂SO₄含量为50mg/L；（2）继代芽增殖培养：将长1.5～3cm的繁殖芽接种到增殖培养基内，诱导继代芽；待繁殖芽基部萌发出2～3个长0.3～0.5cm的继代芽时进行转接；每次转接，将繁殖芽逐渐剪短至0.3～0.5cm；取剪短后的繁殖芽基部萌发扦插生根用的继代芽，获得正冠组培苗；所述的增殖培养基是以1/2MS为基本培养基，添加6‑BA0.8mg/L、IBA0.4mg/L和ZT0.1mg/L；其中1/2MS基本培养基中的Ca(NO₃)₂含量为150mg/L；（3）生根苗培养：在正冠组培苗中选择繁殖芽基部萌发、生长健壮的继代芽扦插于常用的生根培养基上，在温度25～30℃，2000～7000Lx光照条件下进行不定根诱导，培养10～15d后开始生根，25～30d根长0.4～0.6cm时，获得生根苗，将生根苗转到炼苗室炼苗；（4）生根苗移栽：炼苗20～30d,待根系由白色转变成灰白色时，将生根苗进行移栽，移栽时先将生根苗置于清水中漂洗，洗净根部的培养基，晾干根系的表面水分，将生根苗栽入装有红心土与椰糠的混合基质容器中培养；（5）出圃：在容器中的生根苗进行培养8～10月，杉木苗高15～30cm时出圃造林。