用随机序列标记质粒对DNA片段进行高通量两端测序的方法

摘要

本发明公开了一种用随机序列标记质粒对DNA片段进行高通量两端测序的方法。本发明还提供了一种用于对DNA片段进行高通量两端测序的质粒库，质粒库中每个质粒均由质粒骨架片段和自上游到下游依次由标记序列1、待测DNA插入位点序列和标记序列2组成的DNA片段连接而成；且质粒库中任两种质粒，所述标记序列1和所述标记序列2的组合彼此不同；且所述质粒骨架片段中不含有与所述待测DNA插入位点序列相同的序列。利用本发明所提供的质粒库构建的文库除了拥有传统文库的特点外，还可以使用高通量的测序法对其中的基因组DNA进行两端测序。本发明使得长片段DNA两端测序具有了快速、便宜且准确的特点。

主权项

质粒库，其特征在于：所述质粒库中的每个质粒均为由质粒骨架片段和具有特定结构的DNA片段连接而成双链环形DNA，所述具有特定结构的DNA片段自上游到下游依次由标记序列1、待测DNA插入位点序列和标记序列2组成；且所述质粒库中的任意两种质粒，所述标记序列1和所述标记序列2的组合彼此不同；且所述质粒库中的任意两种质粒，所述质粒骨架片段和所述待测DNA插入位点序列均彼此相同；且所述质粒库中，所述质粒骨架片段中不含有与所述待测DNA插入位点序列相同的序列。