发明名称 |
一种鸡GM-CSF蛋白及其制备方法和应用 |
摘要 |
本发明涉及一种鸡GM-CSF蛋白的制备方法,包括如下步骤:a.合成优化的编码鸡GM-CSF蛋白的核苷酸序列,该核苷酸序列如序列SEQ ID No:1所示;b.利用SEQ ID No:1所示序列构建表达载体,所述表达载体为:pFastBac1-hi s-thrombin-GM-CSF;c.将b步骤得到的表达载体进行病毒包装,得到病毒原种;d.将病毒原种进行扩增培养,然后感染对数期的sf9细胞,培养感染后的sf9细胞24-72h,收集培养基中的上清,经离心、层析处理,即得。本发明还提供该方法制得的鸡GM-CSF蛋白以及该蛋白的应用。本发明的制备方法,蛋白表达水平高、易于放大、利于大规模生产。 |
申请公布号 |
CN105349578A |
申请公布日期 |
2016.02.24 |
申请号 |
CN201510870603.1 |
申请日期 |
2015.11.30 |
申请人 |
肇庆大华农生物药品有限公司;广东温氏大华农生物科技有限公司 |
发明人 |
任广彩;黄妙容;陈瑞爱;刘传高;黄文科 |
分类号 |
C12N15/866(2006.01)I;C12N15/27(2006.01)I;A61K39/39(2006.01)I;A61K39/12(2006.01)I;A61P33/14(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/866(2006.01)I |
代理机构 |
广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 |
代理人 |
胡拥军 |
主权项 |
一种鸡GM‑CSF蛋白的制备方法,其特征在于包括如下步骤:a.合成优化的编码鸡GM‑CSF蛋白的核苷酸序列,所述优化的编码鸡GM‑CSF蛋白的核苷酸序列如序列SEQ ID No:1所示;b.利用SEQ ID No:1所示序列构建表达载体,所述表达载体为:pFastBa c1‑his‑thrombin‑GM‑CSF;c.将经过b步骤得到的表达载体进行病毒包装,得到病毒原种;d.将经过c步骤得到的病毒原种进行扩增培养,然后收集扩增后的培养基上清液并用收集到的上清液感染对数期的sf9细胞,然后在培养基中培养感染后的sf9细胞24‑72h,收集培养基中的上清,经离心、层析处理,得到鸡GM‑CSF蛋白。 |
地址 |
526238 广东省肇庆市大旺经济开发区丰盈工业园内 |