ECMA复合微生物菌剂的制备方法

摘要

ECMA（Ecols Composite Microbial Agents）微生物菌剂的制造方法，将纯化后的青霉菌接种在马铃薯培养基斜面上，经培养后再接种在摇瓶培养基中，摇瓶震荡培养后接种在液体种子培养基中，培养36～54小时后喷洒接种至固体发酵培养基上，在26～37℃进行培养，通风量为1:0.2～0.8，发酵136～168小时。制成的青霉菌孢子粉,并与枯草牙孢杆菌复合后制成为一种农业微生物复合菌剂，具有解磷和产生多种生理活性物质的功能，可提高土壤中磷的利用率，预防并减少土传病害，并有增产增收的功效。

主权项

ECMA复合微生物菌剂的制造方法，其特征在于该方法按下述步骤进行：（1）斜面菌种培养：在装有马铃薯培养基的试管中，接种菌株青霉菌(黑龙江棵乐农业有限公司提供)，在26℃～34℃斜面培养一周，直至气生的孢子堆呈青绿色；（2）摇瓶菌种培养基与菌种培养：培养基：葡萄糖10～50g/l，KH₂PO₄ 0.5～2 g/l，K₂HPO₄ 0.5～3 g/l，(NH₄)₂SO₄ 1～4 g/l，MgSO₄·7H₂O 0.2 g/l，玉米浆0.5～3 g/l，CaCO₃5～20 g/l，调节 pH至7.0～8.0；在装有摇瓶菌种培养基的三角瓶中，接种上述斜面培养菌种，在150转/分摇床上，26～37℃，培养20—28小时；（3）液体发酵罐种子培养基与扩大培养：培养基：葡萄糖10～200g/l，KH₂PO₄ 1～2 g/l，K₂HPO₄ 1～3 g/l，(NH₄)₂SO₄ 2～6 g/l，MgSO₄·7H₂O 0.2 g/l，氨基酸颗粒1～10 g/l，PH值为5.5～8.5，发酵温度28～40℃，通风比0～1.0vvm，搅拌转速为20～500rpm，培养时间为36～54小时。（4）固体发酵：培养基：谷糠或稻糠35～55%、淀粉8～16%、氨基酸颗粒4～10%、麦麸0.5～2%、磷矿石粉10～15%、草炭灰或秸秆粉20～30%，按此比例配制的固体发酵培养基加水25～40%，pH6.0～8.0。在装有上述培养基的固体培养箱中接种发酵罐种子液；接种量为5～10%，在26～37℃进行培养，通风量为1:0.2～0.8，发酵136～168小时，产生孢子后，在55～80℃烘干得到所述的块状或粉末状产品。（5）均匀混合：将上述1—4步骤制成的粉末状产品与枯草牙孢杆菌（菌种Bacillus subtilis Y1336来源自台湾百泰生物科技公司）微生物制剂按1：1的比例均匀混合后，制成ECMA。