金铁锁四倍体植株的诱导方法

摘要

金铁锁四倍体植株的诱导方法，属于化学诱导植物多倍体的育种方法。本发明金铁锁茎段在分化培养基上预培养2～3d，用含40mg/L秋水仙素处理2d，然后再将诱导后的茎段接种至未附加秋水仙素的分化培养基中继续培养25d，其诱导效果最佳，诱导变异率达到41.59%。与正常二倍体芽苗比较，变异芽苗的叶片大、叶色深、叶片厚、节间短、茎杆和根粗。切取变异的芽苗茎段重复7次分化培养，使其体细胞同质化，得到稳定的变异芽苗；将其接种于1/2MS+0.3mg/L IBA+0.1mg/L NAA+0.3g/L CA生根培养基，生根率为91.7%。对变异后的组培苗根尖染色体计数，该细胞中期染色体数目为2n=4x=56，即为四倍体。

主权项

金铁锁四倍体植株的诱导方法，其特征是包括以下步骤：（1）金铁锁幼嫩茎段在MS+6‑BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+TDZ0.01mg/L的分化培养基中预培养2～3d，取出茎段，转移至含浓度30～40mg/L秋水仙素的上述分化培养基中诱导培养1～3d，使部分金铁锁二倍体细胞成为四倍体细胞； （2）取步骤（1）经秋水仙素分化培养基诱导培养的茎段接种在未附加秋水仙素的分化培养基上培养25d，该分化培养基为：MS+6‑BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+TDZ0.01mg/L；（3）切取步骤（2）变异明显且长至1～2cm芽苗的幼嫩茎段，接种在未附加秋水仙素的MS+6‑BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+TDZ0.01mg/L的分化培养基上培养25d，再次诱导芽苗；（4）重复步骤（3）5～7次，得到多倍体性状稳定的变异芽苗；（5）当变异芽苗的苗长至2cm时，将其接种在1/2MS+0.3mg/L IBA+0.1mg/L NAA+ 0.3g/L CA的生根培养基上，其生根率可达91.7%，该变异株组培苗根尖细胞的中期染色体数目为2n=4x=56，即为四倍体。