主权项 |
红花药材的指纹图谱鉴别方法,其特征在于包括以下步骤:(1)供试品溶液的制备:取过30~50目筛的红花药材粉末1.50~4.00g,精密称定,加水40~60ml,浸泡20~40分钟,加热回流1~3小时,提取液滤过,取滤液浓缩至10~20ml,加入80%~95%乙醇30~50ml,2~5℃静置一夜;吸取上清液1~3ml,50~70℃空气吹干,加水2~5ml溶解,用0.22~0.45μm的微孔滤膜滤过,取续滤液,备用;(2)指纹图谱测定:取供试品溶液适量,注入高效液相色谱仪,记录75分钟以内的色谱图,得到由其共有特征峰构成的红花药材对照高效液相指纹图谱;其中高效液相色谱分析的条件如下:用十八烷基键合硅胶为填充剂;Agilent Zorbax Eclipse XDB C18色谱柱4.6×250mm;乙腈‑0.01‑2%冰醋酸为流动相梯度洗脱,梯度程序为:0min→5min→30min→45min→60min→62min→75min:对应流动相:乙腈:2%→7%→15%→20%→35%→50%→50%;0.01‑2%冰醋酸:98%→93%→85%→80%→65%→50%→50%;检测波长为200nm‑400nm;流速为0.2ml/min‑2ml/min;柱温为20℃‑50℃;所得到的红花药材的对照指纹图谱有12个共有特征峰,其相对保留时间分别为:1号峰:0.40,2号峰:0.43,3号峰:0.53,4号峰:0.92,5号峰:0.95,6号S峰:1.00,7号峰:1.33,8号峰:1.68,9号峰:1.77,10号峰:1.99,11号峰:2.45,12号峰:3.14。 |