光子计数型多通道时间分辨荧光免疫分析系统及计数方法

摘要

本发明属于荧光免疫分析技术领域，涉及一种光子计数型多通道时间分辨荧光免疫分析系统，包括光源模块、检测模块以及时间标刻光子计数分析/控制模块。本发明同时涉及上述系统采用的计数方法：脉冲光激发待测样品，样品受激发产生的荧光信号送入PMT光子计数头后输出的脉冲信号的计数方法如下：将激发脉冲光的周期作为计数周期，将每个计数周期划分为多个宽度相同的时间间隔，在每个计数周期里，将该周期的激发光脉冲发送之后检测到的每个光子累加至相应的时窗所对应的存储器中，亦即利用时窗所在区间标刻每个光子在该脉冲周期中的位置，多个周期的计数之后，将上述存储器中的数据传入上位计算机中。本发明的多通道时间分辨荧光免疫分析系统，造价低廉，且有很高的灵敏度。

主权项

一种光子计数型多通道时间分辨荧光免疫分析系统，包括光源模块、检测模块以及时间标刻光子计数分析/控制模块；所述光源模块包括LED(2)以及调制器(1)；所述检测模块包括第一光纤准直器(3)、光波分复用器(4)、第二光纤准直器(5)、光开关(6)、光纤探头(7)、暗箱(8)、多孔样品板(9)、滤光片(10)以及PMT光子计数头(11)，多孔样品板(9)置于暗箱(8)内，光纤探头为多根，每根探头穿过暗箱上的孔，然后悬空置于多孔样品板的相对应的每个孔的上方；所述时间标刻光子计数分析/控制模块包括控制器(12)及上位计算机(13)；控制器(12)在接收到上位计算机(13)的命令后，产生触发脉冲的电信号发送给调制器，调制器产生的调制信号控制LED发出激发光脉冲；LED(2)发出的激发光脉冲依次经过第一光纤准直器(3)、光波分复用器(4)、第二光纤准直器(5)及光开关(6)的选通的测量通道后输出至某根光纤探头(7)；多孔样品板(9)中样品受激发产生的荧光信号由光纤探头(7)接收后，经由光开关(6)按原路返回至光波分复用器(4)，再经过滤光片(10)滤光后被送入PMT光子计数头(11)，PMT光子计数头(11)输出的信号被送入控制器(12)，控制器(12)将计数结果传入上位计算机(13)；其中，LED(2)的中心波长为365nm，经调制后的激发光脉冲半峰宽为50μs，并通过耦合光纤实现激发光脉冲的输出；所述光波分复用器(4)的中部固定有截止波长为505nm的二向色镜，对365nm激发光反射率大于95％，对610nm荧光透射率大于97％；所述第一光纤准直器(3)于405nm处具有最大透过率，第二光纤准直器(5)于350～700nm波长区间反射率小于1％。