一种猪肺炎支原体环介导等温扩增试剂盒及其应用

摘要

本发明公开一种猪肺炎支原体环介导等温扩增试剂盒及其应用，该试剂盒包括LAMP引物、2×反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、荧光目视检测试剂、超纯水和猪肺炎支原体DNA模板，所述的LAMP引物包括外引物F3与B3、内引物FIP与BIP和环引物LF与LB，其应用包括使用该试剂盒检测疑似猪支原体肺炎的病变组织及猪肺炎支原体的培养物。特异性检测和敏感性检测证实，本发明提供的LAMP检测方法可实时监测反应并且定量检测出猪肺炎支原体的拷贝数，快速准确的获得检测结果，为简便、快速和可靠的检测猪肺炎支原体带来便利。

主权项

一种猪肺炎支原体环介导等温扩增试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括LAMP引物、2×反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、荧光目视检测试剂、超纯水和猪肺炎支原体DNA模板，所述的LAMP引物包括外引物F3（SEQ ID NO：1）与B3（SEQ ID NO：2）、内引物FIP（SEQ ID NO：3）与BIP（SEQ ID NO：4）和环引物LF（SEQ ID NO：5）与LB（SEQ ID NO：6）；其中引物的序列分别为：F3  AGGCAGCAACTTCAACAAB3  ATCAGATCCAGTAATTAGTCGAFIP  GGCGCTGGACTTAAATTAGCTCAAAAAACCAGGATGCACAABIP  ATTGCCCCTGAAAATGGAAGTTCATAGGCAACAATCGGAATLF  GCTTGCTGAGTGAGTCAGTTATLB  AGTTGGAACTGCTGTTAATACA所述的2×反应缓冲液包括Tris‑HCL、KCL、MgSO₄、(NH₄)₂SO₄、Tween20、Betaine和dNTPs。