一种偶联抗体的合成、检测方法和应用

摘要

本发明提供一种偶联抗体的合成和应用，公开了Hα1-210-DEC205偶联抗体合成方法：包括以下步骤：①Hα1-210蛋白表达、纯化、鉴定，②DEC-205单克隆抗体，③Hα1-210-DEC205偶联抗体合成；同时公开了Hα1-210-DEC205偶联抗体的体外细胞系实验方法和在体分析方法。本发明的有益效果是不降低机体免疫力的情况下，仅抑制针对AchR的异常免疫应答，起到治疗MG的作用。

主权项

一种偶联抗体的合成方法，其特征在于：包括以下步骤：①Hα1‑210蛋白表达、纯化、鉴定：采用RT‑PCR的方法从表达人AchR的细胞系TE671中扩增AchRα1亚单位胞外段基因Hα1‑210，同原核表达载体pET16b连接，构建重组表达载体，转化BL21感受态菌，IPTG诱导表达；②DEC‑205单克隆抗体纯化：MiniPerm系统中连续旋转培养分泌DEC‑205，GL‑117单克隆抗体的大鼠杂交瘤细胞，培养上清超滤浓缩后经50％饱和硫酸胺沉淀，最后经蛋白A/G亲和层析柱纯化；③Hα1‑210‑DEC205偶联抗体合成：纯化后的抗体经2‑巯基乙胺·盐酸还原后，同异型双功能交联剂SMCC活化的Hα1‑210蛋白混合，4℃过夜连接。