一种口蹄疫病毒微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒

摘要

本发明涉及一种口蹄疫病毒微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒，其由一步法微滴数字PCR检测试剂和若干个微滴发生卡组装而成，其中微滴数字PCR检测试剂用合适的外包装盒包装以下试剂，贴标签标示名称、批号、生产日期、有效期。本发明的试剂盒具有灵敏度高、特异性强、高准确度和精确度，可实现精确定量的数字PCR检测方法，用于口蹄疫病毒的快速精确检测。

主权项

一种口蹄疫病毒微滴数字PCR绝对定量检测试剂盒，其特征在于：主要由一步法微滴数字PCR检测试剂和若干个微滴发生卡组装而成，其中一步法微滴数字PCR检测试剂包括以下试剂：溶液A：RNase Free dH₂O，一支，1mL；溶液B：一步法ddPCR探针法预混液，一支，900μL；溶液C：探针法ddPCR微滴发生油，一支，7mL；溶液D：ddPCR探针法质控液，3.5mL；溶液E：阳性对照，一支，40μL；溶液F：阴性对照，一支，40μL；使用基因组RNA为阳性模板，使用0.01M pH8.0的Tris‑EDTA缓冲液稀释后冷冻保存；阳性对照制剂按400μL定量分装；使用RNase Free dH₂O为阴性对照；其中所述的溶液B：一步法ddPCR探针法预混液900μL的组成为：500μL的2X One‑step RT‑ddPCR Supermix for probes，上、下游引物分别为90μL，特异探针为30μL，引物和探针的浓度均为10μM；RNase Free dH₂O 190μL；所述上、下游引物的序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；特异探针的序列如SEQ ID NO:3所示。