一种用于定量检测猪肉冒充牛肉的检测方法

摘要

本发明公开了一种用于定量检测猪肉冒充牛肉的检测方法，包括三步：一、建立牛肉和猪肉实际掺入比例与检测比例之间的线性关系；二、检测待检肉的牛肉的比例；三、根据线性关系计算得出待检肉中牛肉的比例；在PCR检测法的基础上，结合毛细管电泳进行定量检测，采用QIAxcel Advanced DNA分析系统对PCR片段进行高灵敏度的检测，获得可靠核酸浓度结果，再通过统计学的方法，得出牛肉检测比例和实际牛肉比例之间的关系，排除干扰因素的影响；利用牛肉检测比例和实际牛肉比例之间的关系，可以在PCR检测法的基础上，结合毛细管电泳进行定量检测，从而计算出牛肉比例。

主权项

一种用于定量检测猪肉冒充牛肉的检测方法，其特征在于,所述检测方法包括三步：一、建立牛肉和猪肉实际掺入比例与检测比例之间的线性关系；二、检测待检肉的牛肉的比例；三、根据线性关系计算得出待检肉中牛肉的比例；所述第一步建立牛肉实际掺入比例与检测比例之间的线性关系，包括以下步骤：(1)将处理干净的牛肉和猪肉冻干；(2)冻干后的牛肉和猪肉，研磨成粉末，按牛肉梯度比例掺入牛肉粉末和猪肉粉末，配比成含10％‑80％牛肉的混和肉；(3)称取各浓度的混合肉粉末0.1g，提取DNA；(4)以所提取的DNA作为模板，以16S RNA作为靶基因，进行PCR扩增；(5)扩增结束后，进行毛细管电泳检测，对各浓度的牛肉粉末PCR扩增物中的牛肉PCR扩增物浓度定量分析；(6)根据检测的牛肉比例和实际的牛肉掺入比例建立线性关系；所述第二步检测待检肉的牛肉的比例：检测步骤同第一步中步骤(1)至步骤(5)，记录检测得出的牛肉比例；所述第三步计算待检肉中牛肉的比例：将第二步中检测出的牛肉比例，结合第一步的线性关系，计算得出待检肉中牛肉的比例。