| 摘要 |
1. Способ синтеза терапевтического пептида с использованием поэтапной твердофазной Fmoc-химии, включающий следующие стадии:(a) набухания Fmoc-смолы Зибера (также именуемой как амидная смола Зибера или Fmoc амидная смола Зибера) в диполярном апротонном растворителе;(b) удаления защитных Fmoc групп с использованием раствора пиперидина в диполярном апротонном растворителе;(c) промывки смолы после удаления защитных Fmoc групп диполярным апротонным растворителем;(d) активирования Fmoc-аминокислоты для присоединения к смоле, у которой удалены защитные группы, путем растворения Fmoc-аминокислоты и связующего реагента (реагентов) в диполярном апротонном растворителе с последующим добавлением основания и перемешиванием;(e) добавления раствора активированной Fmoc-аминокислоты к смоле в реакторе;(f) присоединения активированной Fmoc-аминокислоты с использованием (2-(6-хлор-H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметиламиний гексафторфосфата) (HCTU) или 2-(1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний тетрафторкората (TBTU)/1-гидроксибензотриазол (HOBt) с основанием в диполярном апротонном растворителе в качестве связующего реагента;(g) промывки смолы после каждого присоединения Fmoc-аминокислоты;(h) повторения стадий (b)-(g) до образования пептида;(i) отщепления целевого пептида от смолы при одновременном удалении защитных групп боковых цепей аминокислоты, используя отщепляющий коктейль;j) отфильтровывания отщепляющей смеси от смолы и(k) выпаривания фильтратов и осаждения и частичной очистки сырого продукта от концентрированного раствора органическим растворителем до получения частично очищенного пептида.2. Способ по п. 1, где диполярным апротонным растворителем является диметилформамид (ДМФ).3. Способ по любому из предшест |
