一种制备蜀葵单倍体细胞的方法

摘要

一种制备蜀葵单倍体细胞的方法，属于生物工程领域。本发明利用了植物细胞的全能性原理和植物组织培养技术以及流式细胞术，将灭菌后的蜀葵花药作为外植体分散接种于诱导愈伤组织的培养基中，筛选出合适的激素配比，在适宜的条件下培养，20d左右诱导出愈伤组织，继代过3-5次后利用流式细胞仪鉴定得到的愈伤中细胞的倍性，发现了愈伤中单倍体细胞的存在。本发明首次验证了利用花药培养得到蜀葵单倍体细胞的可行性，并筛选出了诱导率高的激素配比。本发明诱导过程简单，成本低廉，利用流式细胞术鉴定倍性快速、可靠。为蜀葵单倍体育种、培育新品种提供了一条新途径并为植物单倍体细胞悬浮培养动力学研究奠定了基础。

主权项

一种制备蜀葵单倍体细胞的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)蜀葵花蕾采摘和预处理：五月底，采集尚未开放的蜀葵花蕾，镜检花粉鉴定花药发育时期处于单核中期或者后期；并放入4℃冰箱进行低温预处理24～72h；(2)蜀葵花药培养：花药消毒处理后无菌条件下接种于固体培养基上；在生化培养箱中25～27℃温度条件下暗培养20d左右即可得到愈伤组织；继代培养3～5次；(3)利用流式细胞术鉴定不同倍性细胞，处理数据统计其中单倍体细胞和多倍体细胞的数目和比例。