宽范围发光免疫分析

摘要

本发明涉及一种方法，该方法用于在无需稀释样品和重复分析的情况下在单次分析中量化具有宽浓度范围的分析物。本发明的关键特征是具有事件的两个循环，包括样品结合至探针、结合反应，以及检测。在结合与检测的第一循环之后，将该探针再浸入相同的样品容器中以使该样品容器中额外的分析物在比第一循环的结合条件更有利的结合条件下结合。

主权项

一种检测液体样品中的处于宽浓度范围中的分析物的方法，包括顺序如下的步骤：(a)获得具有固定于探针梢端上的第一抗体的探针，其中该梢端表面的直径是≤5mm；(b)将所述探针梢端浸入容纳含有分析物的样品溶液的样品容器中10秒至2分钟，并使所述样品溶液在所述样品容器中以0‑500rpm侧向流动，从而使所述分析物与在所述探针梢端上的第一抗体结合；(c)将所述探针梢端浸入容纳试剂溶液的试剂容器中，所述试剂溶液包含与结合配对的第一成员缀合的第二抗体的试剂，从而使所述试剂与所述分析物结合；(d)将所述探针梢端浸入容纳第一洗液的第一洗涤容器中以洗涤所述探针梢端；(e)将所述探针梢端浸入容纳扩增溶液的扩增容器中，所述扩增溶液包含与一个或多个发光标记缀合的结合配对的第二成员，从而在所述探针梢端上形成所述分析物、所述第一抗体、所述第二抗体以及所述结合配对的第一和第二成员的免疫复合物；(f)将所述探针梢端浸入容纳第二洗液的第二洗涤容器中以洗涤所述探针梢端；(g)通过测量在所述探针梢端上形成的免疫复合物的发光信号获得第一结果；(h)将所述探针梢端浸入相同的样品容器中1‑30分钟，并使所述样品溶液在所述样品容器中以0‑1200rpm侧向流动，从而使所述样品中额外的分析物与所述探针梢端上的第一抗体结合；(i)重复步骤(c)至(f)1‑10次；和(j)通过测量在所述探针梢端上形成的最终免疫复合物的发光信号获得第二结果；和(k)合并所述第一结果和第二结果，并在宽范围中分析所述分析物的浓度；其中所述第一抗体和所述第二抗体是对抗所述分析物的抗体。