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环D‑脯氨酸D‑苯丙氨酸的一种微生物生产技术, 其特征在于步骤如下：发酵培养：将产碱杆菌（Alcaligenes sp. A‑2.）无菌接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中,37℃摇床振荡(150转/分钟)培养5天;发酵液在4500r/min离心15min后取上清液备用；环二肽粗提：将大孔吸附树脂X‑5填装入层析柱，取上述发酵上清液均匀滴加在树脂层上面，待其完全沉入树脂面后，静态吸附1h，用95%乙醇水溶液作为洗脱液，以1mL/min的流速洗涤树脂柱，可以根据吸附柱的规格相应扩大流速，收集洗脱液；环二肽纯化：通过HPLC，即高效液相制备色谱分离纯化上述洗脱液，流动相为20‑100% 甲醇MeOH, 流速1ml/min, 温度20‑25度，出峰时间5.477min，在214纳米处5.477分钟时出现的吸收峰收集该物质；冷冻干燥：将上述环二肽纯品用旋转蒸发仪38摄氏度浓缩30‑60min，用液氮速冻，经冷冻干燥机‑40度，3天干燥后即为环二肽结晶粉末，纯度可达98%，可常温保存。 |
