发明名称 |
一种快速区分鸭甲肝病毒1型和3型PCR-HRM的引物和方法 |
摘要 |
本发明公开了一种快速区分鸭甲肝病毒1型和3型的PCR-HRM引物和方法,该方法首先构建了DHAV-1和DHAV-3相应目的片段的质粒样品作为阳性质粒,然后从样品中提取病毒RNA并反转录为cDNA,再以cDNA为模板,利用所设计的特异性引物对cDNA进行PCR-HRM扩增;对扩增产物进行HRM分析,确定病毒类型。本发明操作简单,只需在普通PCR反应之前加入荧光饱和染料;检测快速且高通量,整个操作过程需约3.5小时,即可完成96/384孔板的PCR产物检测,极大缩短了检测时间;费用低,不需要多条引物和特异性探针;敏感性高、特异性和重复性好,有利于在临床上的推广应用。 |
申请公布号 |
CN105331740A |
申请公布日期 |
2016.02.17 |
申请号 |
CN201510770565.2 |
申请日期 |
2015.11.12 |
申请人 |
广东省农业科学院动物卫生研究所 |
发明人 |
董嘉文;张建峰;孙敏华;李林林;刘志成 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 |
代理人 |
胡辉 |
主权项 |
一种快速区分鸭甲肝病毒1型和3型PCR‑HRM的引物,其核苷酸序列如下所示:P1:5’‑TAGTGTTGTGGGATACCC‑3’(SEQ ID NO:1);P2:5’‑GTGGGTGTTTTACGTGTACTC‑3’(SEQ ID NO:2)。 |
地址 |
510640 广东省广州市天河区五山白石岗街广东省农科院动物卫生研究所 |