一种人造血管的构建方法

摘要

本发明公开了一种人造血管的构建方法，具体为在涤纶编织物管的内外均匀涂覆一种引入两种功能多肽的再生丝素蛋白。这两种多肽，一种是链侧基含有大量的亲水性基团，主要是酸性氨基酸、分子呈负电性的多肽，另一种是含有8个RGD的、促进细胞粘附的多肽。这两种多肽来自于生物体表达，序列是来自于天然蛋白质的类似物，无毒无刺激性，分子量单一，能与丝素蛋白共价结合涂覆于涤纶管，持续稳定地赋予人造血管亲水性能和负电性，促内皮化，降低对细胞的伤害，阻止蛋白沉积和血细胞聚集而造成血栓堵塞。本发明构建的人造血管具有良好的生物相容性，具有类似于天然血管的负电性膜层和促进内皮细胞粘附生长的微环境，这样有利于保护血液细胞和防止血栓形成。

主权项

一种人造血管的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1)设计并构建携带有具有亲水性和负电荷多肽和促进细胞粘附多肽的基因的原核系统表达载体；所述具有亲水性和负电荷多肽为第一功能多肽，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.1；所述促进细胞粘附多肽为第二功能多肽，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2；步骤2)将已经设计构建好的携带第一功能多肽基因和第二功能多肽基因的原核系统表达载体转染大肠杆菌细胞诱导培养数小时；步骤3)收集并破碎上述大肠杆菌细胞，再经过纯化，获得具有第一功能多肽和第二功能多肽，使用时配制成功能多肽水溶液；步骤4)利用家蚕生丝制备再生丝素蛋白水溶液；步骤5)将涤纶丝采用编织机纺成内径为1～6mm的管状编织物；步骤6)将制得的再生丝素蛋白‑功能多肽水溶液注入上述涤纶管状编织物，并添加一定含量的交联剂，冷冻干燥后摘下管状样品；或将制得的再生丝素蛋白水溶液注入上述涤纶管状编织物，并添加一定含量的交联剂，冷冻干燥后浸入功能多肽水溶液中，再次加入交联剂，在4℃温度下过夜反应，最后用去离子水浸泡风干。