一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法

摘要

本发明公开了一种快速检测发酵液中苏氨酸含量的方法，将样品溶液稀释后与含有NADH、PLP、乙醇脱氢酶和DTT的溶液混匀反应后，再与含有LTA的溶液反应，通过检测计算OD₃₄₀降低速率，与标准曲线进行比较获得苏氨酸的含量。本发明的方法，可简单、快速且准确地检测发酵液中苏氨酸的含量，检测通量高、费用低、时间短、误差小。

主权项

一种检测样品中苏氨酸含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(i)将样品与第一反应溶液混合均匀，得到第一混合溶液；(ii)将所述第一混合溶液置于4±1℃放置10‑90min后恢复温度至15‑30℃；(iii)将第一混合溶液与第二反应溶液混合均匀得到第二混合溶液；(iv)检测所述第二混合溶液的OD₃₄₀，每隔1‑5分钟检测一次，共检测5‑7次；(v)以检测时间和对应的OD₃₄₀作图，计算斜率即为样品的OD₃₄₀降低速率；(vi)将计算得到的OD₃₄₀的降低速率与标准曲线进行比较，得到所述发酵液中苏氨酸含量，其中，所述第一反应溶液含有HEPES buffer、NADH、PLP、乙醇脱氢酶、DTT和水；所述第一混合溶液中含有10‑500mM HEPES buffer、100μM‑1000μM NADH、10μM‑100μM PLP、1U‑50U乙醇脱氢酶和0.5mM‑8mM DTT；所述第二反应溶液中含有1‑20U LTA，余量为水。