一种筛选靶蛋白核酸配体的方法和试剂盒

摘要

本发明公开了一种快速筛选高特异亲和靶蛋白的核酸配体的方法及筛选试剂盒，筛选方法主要是将待筛核酸标记上生物素，将之与靶蛋白或提取物等样本进行结合反应后，加到预包被链霉亲和素的微孔板中，再经与抗靶蛋白抗体及标记二抗的孵育和洗脱后，检测标记二抗的信号强度，从而找到与靶蛋白高特异高亲和的核酸配体，该方法可用于筛选高特异性结合靶蛋白的核酸类药物、靶向制剂、疫苗、诊断或检测探针和试剂盒。而发明的筛选试剂盒则是由上述筛选和优化出的阳性核酸探针、竞争探针、靶蛋白或提取物，抗体等含结合、洗脱、显色体系所组成，用于筛选目的蛋白特异结合的核酸配体。本发明可以简单、快速、灵敏地筛选与靶蛋白高亲和特异结合的核酸配体。

主权项

一种快速筛选高特异亲和靶蛋白的核酸配体的方法，其特征在于，包括如下步骤：将待筛选的核酸配体用生物素标记5’端，加入结合缓冲液、靶蛋白或含靶蛋白的混合物，结合反应后再加到预包被的链霉亲和素多孔板中，依次经亲和孵育、洗脱、再加入抗靶蛋白的抗体孵育、洗脱、再加入标记二抗、孵育、洗脱，然后加入底物显色或直接检测信号强度，从而确定高亲和的核酸配体。