在细胞环境中于单分子水平上分析蛋白-蛋白相互作用的方法，和测定在细胞溶质中激活的蛋白密度的方法

摘要

本发明公开了一种在单分子水平上分析蛋白-蛋白相互作用的方法。本发明通过以下方法实现：准备一个基片，在其上结合有第一蛋白结合分子，以形成分子筛，所述分子筛与第一蛋白结合；加入包含有第一蛋白的细胞溶质从而诱导第一蛋白与第一蛋白结合分子筛的结合；当第一蛋白和第一蛋白结合分子筛结合至基片后，向基片中加入含有标记物标记的第二蛋白的细胞溶质；分析在基片上第一蛋白和第二蛋白之间的相互作用。根据本发明，比较和分析可以在每一个细胞中进行，通过向第一蛋白中加入不同种类的细胞，观察第一蛋白与第二蛋白之间的相互作用，能够比较和分析出第一蛋白的激活水平。

主权项

一种测定细胞溶胞产物中活化蛋白浓度的方法，包括：(a)准备一个结合有第一蛋白结合分子的基片，所述的第一蛋白结合分子为准备与第一蛋白结合的生物分子；(b)通过将包含第一蛋白的细胞溶胞产物提供给所述基片，诱导所述第一蛋白和所述第一蛋白结合分子的结合；(c)当所述第一蛋白与所述基片上的第一蛋白结合分子结合时，提供包含标记物标记的第二蛋白的细胞溶胞产物；(d)分析所述基片上所述第一蛋白和所述第二蛋白之间的相互作用，其中，与所述第二蛋白相互作用的第一蛋白，是与第一蛋白结合分子结合的第一蛋白中被激活的第一蛋白；和(e)重复步骤(b)‑(d)，包括在重复步骤的步骤(b)中按预定的比例提高包含第一蛋白的细胞溶胞产物的浓度。