一种GHK三肽的合成方法

摘要

本发明公开了一种GHK三肽的合成方法，采用常规液相合成法，先用乙酸对硝基苯酯对赖氨酸进行保护，然后将Boc-Gly-OH与组氨酸反应得到的二肽用二碳酸二叔丁酯进行保护，最后将保护的二肽与保护的赖氨酸反应，得到GHK三肽。本发明用乙酸对硝基苯酯对赖氨酸进行保护，该保护基可选择性的酰化离羧酸官能团较远的氨基，与现有保护方法相比较，操作步骤简单，降低了生产成本，用二碳酸二叔丁酯对二肽进行保护，减少了其他副产物的生成，增加了化合物的亲酯性，有助于产物的分离纯化，提高了产物的收率，同时还可以减少消旋产物的生成。

主权项

一种GHK三肽的合成方法，其特征在于它由下述步骤组成：(1)合成H‑Lys(Ac)‑OH将赖氨酸完全溶解于蒸馏水中，室温搅拌，用质量分数为10％的氢氧化钠水溶液调节pH值至10～11，加入乙酸对硝基苯酯与1,4‑二氧六环或四氢呋喃的质量‑体积比为1g：5～10mL的混合液，赖氨酸与乙酸对硝基苯酯的摩尔比为1：1～2，室温搅拌反应2～5小时，分离纯化产物，得到H‑Lys(Ac)‑OH；(2)合成Boc‑Gly‑COOSu将Boc‑Gly‑OH与1,4‑二氧六环或四氢呋喃按质量‑体积比为1g：8～10mL混合，室温搅拌，加入N‑羟基丁二酰亚胺，搅拌至溶解，滴加N,N'‑二环己基碳二亚胺与1,4‑二氧六环或四氢呋喃的质量‑体积比为1g：2～5mL的混合溶液，Boc‑Gly‑OH与N‑羟基丁二酰亚胺、N,N'‑二环己基碳二亚胺的摩尔比为1：1～1.5：1～2，室温反应2～3小时，减压过滤除去固体不溶物，得到Boc‑Gly‑COOSu的1,4‑二氧六环或四氢呋喃溶液；(3)合成Boc‑Gly‑His(Boc)‑OH将组氨酸和碳酸氢钠完全溶解于蒸馏水中，所得溶液滴加到步骤(2)得到的Boc‑Gly‑COOSu的1,4‑二氧六环或四氢呋喃溶液中，室温搅拌反应12～24小时；滴加二碳酸二叔丁酯与1,4‑二氧六环或四氢呋喃的质量‑体积比为1g：3～10mL的混合液，加入氢氧化钠，Boc‑Gly‑OH与组氨酸、碳酸氢钠、二碳酸二叔丁酯、氢氧化钠的摩尔比为1：1～2：1～2：1～2：1.5～4，室温反应3～5小时，分离纯化产物，得到Boc‑Gly‑His(Boc)‑OH；(4)合成Boc‑Gly‑His(Boc)‑COOSu将Boc‑Gly‑His(Boc)‑OH与1,4‑二氧六环或四氢呋喃按质量‑体积比为1g：8～10mL混合，室温搅拌，加入N‑羟基丁二酰亚胺，搅拌至溶解，滴加N,N'‑二环己基碳二亚胺与1,4‑二氧六环或四氢呋喃的质量‑体积比为1g：2～5mL的混合溶液，Boc‑Gly‑His(Boc)‑OH与N‑羟基丁二酰亚胺、N,N'‑二环己基碳二亚胺的摩尔比为1：1～1.5：1～2，室温反应2～3小时，减压过滤除去固体不溶物，得到Boc‑Gly‑His(Boc)‑COOSu的1,4‑二氧六环或四氢呋喃溶液；(5)合成Boc‑Gly‑His(Boc)‑Lys(Ac)‑OH将H‑Lys(Ac)‑OH和碳酸氢钠完全溶解于蒸馏水中，所得溶液滴加到步骤(4)得到的Boc‑Gly‑His(Boc)‑COOSu的1,4‑二氧六环或四氢呋喃溶液中，H‑Lys(Ac)‑OH与碳酸氢钠、Boc‑Gly‑His(Boc)‑OH的摩尔比为1.1～1.5：1.1～1.5：1，室温搅拌反应18～20小时，分离纯化产物，得到Boc‑Gly‑His(Boc)‑Lys(Ac)‑OH；(6)合成GHK三肽将Boc‑Gly‑His(Boc)‑Lys(Ac)‑OH加入三氟乙酸与蒸馏水的体积比为1：1的混合液中，Boc‑Gly‑His(Boc)‑Lys(Ac)‑OH与混合液的质量‑体积比为1g：8～10mL，室温搅拌反应2～3小时，用乙酸乙酯萃取，水相减压浓缩至干，得到GHK三肽。