一种快速获取百合脱毒材料的方法

摘要

本发明公开一种快速获取百合脱毒材料的方法，该方法通过一年生百合苗，在低温条件下处理后，采健壮茎尖，用洗衣粉加水搅动洗涤,流水条件下冲洗,晾干后放置备用，将清洗好的茎尖置于浓度75%的酒精溶液+0.1%升汞溶液+吐温80混合液中消毒7min,再用无菌水冲洗,用灭菌滤纸吸干水分后,在显微镜下剥取生长点，接种于固体MS培养基中进行培养，当继代培养叶片达到10-12片时，用RT-PCR方法对材料进行脱毒筛选，筛选出的脱毒材料就可进行脱毒苗的组培快繁。本发明提供的方法具有操作简便，脱毒率可达95%以上，脱毒材料成活率高、生长速率快等特点，提高了效率，节约了资源，具有广泛的实用性。

主权项

一种快速获取百合脱毒材料方法,其特征在于按下列步骤进行：a、将一年生百合苗，在温度2‑4℃的低温下处理20天；b、将步骤a处理后的百合苗，采健壮茎尖，将茎尖用洗衣粉加水搅动洗涤10min, 流水条件下冲洗2h, 晾干后放置备用；c、将清洗好的茎尖置于浓度为75%的酒精溶液20%+0.1%升汞溶液80%+吐温80 2‑3滴的混合液中消毒7min,再用无菌水冲洗4‑5 次,用灭菌滤纸吸干水分后,在显微镜下剥取0.5mm的生长点，接种于固体MS培养基中进行培养；d、当继代培养叶片达到10‑12片时，采用常规的RT‑PCR方法对材料进行脱毒筛选。