发明名称 |
酮还原酶LEK突变体及应用 |
摘要 |
本发明公开了一种酮还原酶LEK突变体及在生物催化制备(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中的应用,所述酮还原酶LEK具有SEQ.ID.NO.2所示氨基酸序列,酮还原酶LEK突变体是将酮还原酶LEK氨基酸位点第209位的S突变G获得的突变体S209G,本发明开发R型酮还原酶,即酮还原酶LEK,再经定点突变改造该酶并建立辅酶再生循环反应体系,催化制备(R)-CHBE的转化率达到100%和e.e.值大于99%,同时该酶Km值较低,为6.05mM;催化反应体系不需要添加昂贵的辅酶NADPH,降低生产成本;而且在较高底物浓度下可大量制备光学纯度高的产物,生产效率较高,有利于工业化生产。 |
申请公布号 |
CN103320403B |
申请公布日期 |
2016.02.10 |
申请号 |
CN201310244684.5 |
申请日期 |
2013.06.18 |
申请人 |
杭州师范大学 |
发明人 |
谢恬;殷晓浦;叶婷婷;沈凌宏;曹丹;王秋岩;谌容;裴晓林 |
分类号 |
C12N9/02(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12P7/62(2006.01)I |
主分类号 |
C12N9/02(2006.01)I |
代理机构 |
杭州天正专利事务所有限公司 33201 |
代理人 |
黄美娟;王兵 |
主权项 |
一种酮还原酶LEK的突变体,其特征在于所述酮还原酶LEK突变体是将酮还原酶LEK氨基酸位点第209位的S突变为G获得的突变体S209G;所述酮还原酶LEK的氨基酸序列为SEQ.ID.NO.2所示。 |
地址 |
310036 浙江省杭州市下沙高教园区学林街16号 |