一种毒黄素的液相色谱-串联质谱检测方法

摘要

本发明公开了一种毒黄素的液相色谱-串联质谱检测方法，包括下列步骤：(1)样品前处理；(2)富集和净化；（3）LC-MS/MS检测。本发明的方法操作简便、定性定量能力较强，可作为检测酵米面质量和评估食品安全风险的可靠方法。

主权项

一种毒黄素的液相色谱‑串联质谱检测方法，其特征在于，包括下列步骤：(1)样品前处理准确称取经过粉碎、均质过的待检测样品1.0g，用5mL超纯水溶液提取毒素，200rpm摇床震荡30min，20℃以下8000rpm离心10min，取上清液，以2mol/L甲酸调节上清液pH值至6～7；用5mL超纯水重复提取一次，合并两次上清液，用超纯水定容至10mL；得到纯净的粗提液；(2)富集和净化富集净化使用固相萃取柱，固相萃取柱为弱阳离子交换柱，粒径33μm，孔径85μm，表面积800m²/g，离子容量1.0meq/g；具体步骤是：首先以1mL甲醇和1mL超纯水活化离子交换柱，活化过程流速控制在1‑2滴/秒，取2mL粗提液注入离子交换柱进行净化富集，流速控制在1滴/秒，接着用1mL超纯水淋洗离子交换柱，以去除杂质，最后以1.0mL甲醇溶液分两次洗脱毒黄素，氮气吹至近干，以50％乙腈水溶液(v/v)定容至0.4mL，待液相色谱‑串联质谱(LC‑MS/MS)检测；(3)LC‑MS/MS检测液相条件Phenomenex Gemini C18反相色谱柱(3.0mm×150mm，5μm)，柱温30℃；进样量20μL；流动相A为水(含有0.1％甲酸(v/v)，5mmol/L甲酸铵)，B为95％乙腈(含有0.1％甲酸(v/v)，5mmol/L甲酸铵)；梯度洗脱；梯度洗脱条件如下：时间/min流速/μL·min^‑1A/％B/％0.025090103.025040603.0150040605.050040605.01250901010.02509010质谱条件离子化方式为电喷雾离子化负模式(ESI‑)；多反应监测模式(MRM)；碰撞气压力(CAD)：6；气帘气压力(CUR)：10；电喷雾电压(IS)：‑4500V；离子源温度(TEM)：600℃；毒黄素的多反应监测离子对及质谱相关参数如下表：*为定量离子。