一种多花黑麦草抗草甘膦植株筛选方法

摘要

本发明公开了一种耗时较短的多花黑麦草抗草甘膦植株筛选方法。本发明采用多花黑麦草成熟种子作为外植体，将多花黑麦草成熟种子清洗灭菌后接种到愈伤组织诱导培养基中培养18～22d得到愈伤组织，接着将愈伤组织转入第一愈伤组织继代培养基中培养18～22d，再将其转入含有草甘膦的第二愈伤组织继代培养基中培养18～22d进行抗草甘膦愈伤组织筛选，再将筛选出的抗草甘膦愈伤组织转接到愈伤组织分化培养基中培养18～22d，当幼苗长至2～3cm时，将存活的幼苗接入生根培养基中培养20～30d，最后进行抗性苗移栽，通过上述方法可以快速获得具有草甘膦抗性的植株，所需时间较短，只需大约一百天即可。适合在生物技术领域推广运用。

主权项

一种多花黑麦草抗草甘膦植株筛选方法，其特征在于包括以下步骤：A、采用多花黑麦草成熟种子作为外植体，将多花黑麦草成熟种子清洗灭菌后接种到愈伤组织诱导培养基中培养18～22d得到愈伤组织，所述愈伤组织诱导培养基由MS培养基、2mg/L的2,4‑D和1mg/L的6‑BA组成；B、将愈伤组织转入第一愈伤组织继代培养基中培养18～22d，所述第一愈伤组织继代培养基由MS培养基、2mg/L的2,4‑D和0.2mg/L的6‑BA组成；C、将经过步骤B处理的愈伤组织转接到第二愈伤组织继代培养基中培养18～22d，所述第二愈伤组织继代培养基由MS培养基、2mg/L的2,4‑D、0.2mg/L的6‑BA、100～500mg/L的草甘膦组成；D、将经过步骤C处理后存活的愈伤组织转接到愈伤组织分化培养基中培养18～22d，所述培养条件为培养温度23±2℃，光照强度为800～1000lx，光照时间为每天16小时，所述愈伤组织分化培养基由MS培养基、0.5～2mg/L的6‑BA组成；E、当幼苗长至2～3cm时，将存活的幼苗接入生根培养基中培养20～30d，所述生根培养基由1/2MS培养基组成，将MS培养基的大量元素以及微量元素减半后得到所述1/2MS培养基；F、当幼苗根系长出后，将其移栽。