对大田罗布麻锈病进行预测的方法及其专用装置

摘要

本发明公开了一种对由罗布麻栅锈菌所引起的罗布麻锈病进行预测的方法以及该方法所专用的装置，主要通过载体制作、取样装置准备、孢子的取样捕捉、离体培养、致病力测算步骤实现的。可较为准确地预测预报出大田种植罗布麻的栅锈病发生情况，进而有效地制订出防治预案。与现有技术相比，本发明解决了在测定病原菌数量的同时，能有效地测定具有侵染能力的病原菌数量，特别是解决了在空气微生物取样器完成取样的罗布麻离体叶片培养时易受污染腐烂的问题，适合于大田商业化种植罗布麻的栅锈病预测预报。

主权项

一种对大田罗布麻锈病菌致病力进行检测的方法，其特征在于主要是通过以下步骤实现的：载体制作，取样装置准备，孢子的取样捕捉，离体培养，致病力测算，具体操作过程如下：载体制作:在无菌环境中培育罗布麻植株并取其叶片作为捕捉载体；a、培养基制作：选择蛭石充分灭菌后作为培养基；b、催芽：将罗布麻种子，用浓度为0.1～0.5%次氯酸钠溶液消毒3～5 min，用纱布过滤后再用无菌水冲洗3～5次，然后将种子在38～42℃的水浴锅中催芽12～15h，待种子芽苞出现露白，倒去水备用；c、定植：将催芽后的种子于10 h内在所述培养基中定植；d、育苗：当植株生长到3轮以上叶片即可；取样装置准备：在专用的取样装置中安放取样载体；a、取样装置的准备：用上部开口并设有盖， 直径或边长为9～15cm，高2～5cm的盒体，在盒体内设置一块载玻片和一块保湿体，将载玻片通过不干胶或粘性硅胶一类的物体粘连于盒体的底部，同时，与载玻片并列将保湿体安放在盒体的底部；b、制作孢子捕捉玻片：在载玻片上下缘10～15mm之间的区域内均匀涂抹一层凡士林作为孢子捕捉玻片；c、制作孢子捕捉叶片：取所培育的罗布麻植株顶部向下第3～5轮处的健康叶片作为孢子捕捉叶片，将选取的罗布麻叶片叶背向上安置于保湿体上，罗布麻叶片的叶梗处压盖小块脱脂棉，用胶带沿叶尖上缘0.5～1cm处将保湿体和叶片粘紧，同样用胶带将叶片下端压盖的脱脂棉粘紧，将取样装置直立，向保湿体上缘注无菌水，至下缘出现滴水为止，盖上盖保存即可；取样：将安放了取样载体的取样装置置于大田中进行取样；a、设置取样点：选择取样点后，在锈病发生前开始取样；b、安放取样装置：使用定容式空气微生物取样器，固定在距地面高度为30～50cm支架上；c、安装取样装置：将安放了制作孢子捕捉玻片和制作孢子捕捉叶片的取样装置安放在仪器内，取样时间为每天8～10点开始取样，下午1～3点和傍晚7～9点各换取一次取样装置，雨天不取样；d、统计载玻片取样孢子数：将取样完毕的取样装置盖上盖子，带回室内，将载玻片取下，置于存贮盒中保存30天后，在显微镜下统计载玻片上的夏孢子数；离体培养：将取样后的孢子捕捉叶片进行离体培养； a、培养装置：用上部开口并设有盖，直径或边长为9～15cm，高2～5cm的盒体作为培养皿，在盒体底部设置呈栅栏状排列的条状体作为衬底；b、离体培养：将取样后的罗布麻叶片放置于培养装置的衬底上，叶片方向与条状体方向纵向相交，叶梗部用脱脂棉包裹并用条形滤纸覆盖，条形滤纸至少有一处端部与培养装置底部接触，然后向培养装置中加无菌水至与衬底平齐，再向滤纸滴加用无菌水配置的浓度为80～100ppm 的苯骈咪唑溶液，至有水滴出现为止，再向叶面均匀喷洒无菌水2～3次，盖上培养装置上盖后置于培养箱中20～23℃下培养8～10天，并按10～12 h光暗交替，光照强度8000～12000LUX；之后进行致病力测算。