发明名称 一种信号肽及其在利用淀粉产γ-氨基丁酸重组菌中的应用
摘要 一种信号肽及其在利用淀粉产γ-氨基丁酸重组菌中的应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明通过分子克隆技术和基因工程技术将去除N端信号肽的α-淀粉酶的融合前期筛选出一条高效分泌α-淀粉酶的信号肽SEQ ID N0.1,构建表达载体,在高产γ-氨基丁酸的菌种中表达。首次报道,以该信号肽介导分泌α-淀粉酶的重组菌天津短杆菌SW07-1/pGAD-pMSPamy能利用廉价淀粉发酵生产γ-氨基丁酸,最优碳源添加条件下5L发酵罐上产量为46.9g/L。
申请公布号 CN105296523A 申请公布日期 2016.02.03
申请号 CN201510819766.7 申请日期 2015.11.23
申请人 江南大学 发明人 饶志明;郑俊贤;徐美娟;杨套伟;张显
分类号 C12N15/77(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12N15/56(2006.01)I;C12P13/00(2006.01)I;C12R1/13(2006.01)N 主分类号 C12N15/77(2006.01)I
代理机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人 耿晓岳
主权项 一种信号肽在提高微生物利用淀粉合成产物上的应用方法,其特征在于,所述方法是将一种高效分泌信号肽与α‑淀粉酶基因融合,然后将融合片段连接到表达载体上并转化到宿主微生物内得到重组微生物,利用重组微生物在以淀粉为碳源的培养基中发酵生产产物;所述信号肽的核苷酸序列是(a)~(d)中任意一项:(a)SEQ ID NO:1所示的DNA;(b)包含SEQ ID NO:1所示的碱基序列、并且具有信号肽活性的DNA;(c)包含在SEQ ID NO:1所示的碱基序列中缺失、取代或添加至少1个碱基所得的碱基序列、并且具有信号肽活性的DNA;(d)与SEQ ID NO:1所示的碱基序列在严紧条件下杂交、并且具有信号肽活性/来源于枯草芽孢杆菌属细菌的DNA。
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