发明名称 |
基于荧光染料法数字微滴PCR检测血液中结核杆菌的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种基于荧光染料法数字微滴PCR检测血液中结核杆菌的方法,在于,包括以下步骤:步骤(1)采集血液,提取血液中的总DNA;步骤(2)将总DNA进行数字微滴PCR反应,反应结束后,检测所有微滴的荧光信号值并设定阈值,根据荧光信号的阈值确定微滴是否包裹结核杆菌DNA,高于阈值的微滴包裹结核杆菌DNA,为阳性微滴,低于阈值的微滴不包裹结核杆菌为阴性微滴;步骤(3)统计阳性微滴数,计算得出结核杆菌DNA的拷贝数,继而得到血液中结核杆菌DNA的总拷贝数。本发明提供的方法取样方便快捷,仅需采集微量血液即可检测出微量结核菌的存在,灵敏度高,检测快速,仅需2小时就可完成检测过程。 |
申请公布号 |
CN105296663A |
申请公布日期 |
2016.02.03 |
申请号 |
CN201510873897.3 |
申请日期 |
2015.12.02 |
申请人 |
昆明医科大学 |
发明人 |
柳爱华;宝福凯;杨佳儒;韩欣霖;徐平;陶律延;彭芸;麻明彪 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
昆明今威专利商标代理有限公司 53115 |
代理人 |
赛晓刚 |
主权项 |
一种基于荧光染料法数字微滴PCR检测血液中结核杆菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤(1)采集血液,提取血液中的总DNA;步骤(2)将总DNA进行数字微滴PCR反应,反应结束后,检测所有微滴的荧光信号值并设定阈值,根据阈值确定微滴是否包裹结核杆菌DNA,高于阈值的微滴包裹结核杆菌DNA,为阳性微滴,低于阈值的微滴不包裹结核杆菌DNA为阴性微滴;步骤(3)统计阳性微滴数,计算得出结核杆菌DNA的拷贝数,继而得到血液中结核杆菌DNA的总拷贝数,从而判断血液中是否含有结核杆菌。 |
地址 |
650500 云南省昆明市呈贡新城雨花街道春融西路1168号 |