一种桑枝抗肿瘤活性多糖RMPW-2的制备方法

摘要

本发明公开了一种桑枝抗肿瘤活性多糖RMPW-2的制备方法。桑枝粉经石油醚回流脱脂、经乙醇回流除去苷类和生物碱等小分子物质后，用双蒸馏水提取出粗多糖，经Sevag法除去蛋白质后，依次用乙醇两次沉淀，再用DEAE琼脂糖凝胶离子交换层析分离出酸性多糖组分，接着经丙烯葡聚糖凝胶S-100层析脱盐后，经丙烯葡聚糖凝胶S-300层析纯化，收集第2个洗脱峰对应的洗脱液，减压浓缩，冷冻真空干燥得到所述产物。本发明制备的产物，纯度均一，分子量约为5.06×10³Da，对人宫颈癌细胞Hela和人胃癌细胞SGC-7901的生长有明显抑制作用，对人胚胎肾细胞HEK293和小鼠巨噬细胞RAW264.7生长均无不良影响，可用于抗肿瘤产品开发。

主权项

一种桑枝抗肿瘤活性多糖RMPW‑2的制备方法，其特征在于：1)采集桑树春季新生嫩桑枝或春季老桑枝，太阳光下自然晒干，切片，于40℃烘箱中烘干至恒重，高速粉碎机粉碎后过80‑100目筛，得到桑枝粉；2)将桑枝粉用石油醚溶液和乙醇进行脱脂、除苷类和生物碱后获得桑枝粉残渣；3)将桑枝粉残渣加入双蒸馏水从桑枝中提取出粗多糖；4)将粗多糖用Sevag法除去蛋白质，并用乙醇进行两次沉淀；5)接着依次通过DEAE‑Sepharose Fast Flow离子交换层析柱分离洗脱、通过Sephacryl S‑100层析柱除盐洗脱、通过Sephacryl S‑300层析柱纯化洗脱后，收集第2个洗脱峰的洗脱液，得到多糖组分RMPW‑2。