卷烟烟气中芳香胺类化合物体外诱导上皮细胞中MUC5AC表达的检测方法

摘要

本发明公开了一种卷烟烟气中芳香胺类化合物体外诱导上皮细胞中MUC5AC表达的检测方法，包括：步骤1，以pGL6为质粒载体，构建含有MUC5AC启动子的质粒；步骤2，将步骤1所得质粒转染入人气道上皮细胞16HBE中，得到MUC5AC-promotor-pGL6-16HBE细胞；步骤3，在步骤2所得细胞中加入卷烟烟气中的芳香胺类化合物，作用至少48h；步骤4，对步骤3的作用产物进行荧光素酶活性检测，依据所得的荧光素酶活性，得到上皮细胞中MUC5AC的诱导表达倍数。本发明提供的检测方法，操作简单，方便快速，灵敏度高，能够准确检测卷烟主流烟气中芳香胺类物质对人气道上皮细胞中MUC5AC表达的诱导作用。

主权项

一种卷烟烟气中芳香胺类化合物体外诱导上皮细胞中MUC5AC表达的检测方法，其特征在于，包括：步骤1，以pGL6为质粒载体，构建含有MUC5AC启动子的MUC5AC‑promotor‑pGL6质粒；步骤2，将MUC5AC‑promotor‑pGL6质粒转染入人气道上皮细胞16HBE中，得到MUC5AC‑promotor‑pGL6‑16HBE细胞；步骤3，在MUC5AC‑promotor‑pGL6‑16HBE细胞中加入卷烟烟气中的芳香胺类化合物，作用至少48h；步骤4，对步骤3的作用产物进行荧光素酶活性检测，依据所得的荧光素酶活性，得到上皮细胞中MUC5AC的诱导表达倍数。