一种制备可皆霉素的方法

摘要

本发明涉及一种制备可皆霉素的方法，将狭旋毛壳菌种活化后制备种子液，将种子液发酵培养，将发酵培养得到的菌体用乙酸乙酯提取，得到乙酸乙酯提取物，再将乙酸乙酯提取物分离后得到可皆霉素。本发明以球壳科毛壳属狭旋毛壳为原料进行可皆霉素的提取分离，方法简单，成本低，具有可持续性，分离得到可皆霉素单体，提取分离过程中用到的溶剂可回收利用，提取量大，可工业化生产。

主权项

一种制备可皆霉素的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）菌种活化：将狭旋毛壳菌种接种到平板培养基上，25℃恒温培养72小时，获得活化菌种；（2）制备种子液：将步骤（1）中得到的活化菌种接种到装有无菌培养液A的无菌三角瓶中，转速为150rpm，温度为25℃条件下震荡培养72小时，获得种子液；培养液A的配方为：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L，pH6.0±0.1；（3）发酵培养：将步骤（2）制备的种子液与培养液B按照体积比为5：100接入到无菌三角瓶中，转速为150rpm，温度为25℃条件下震荡培养7d，获得发酵液；培养液B的配方为：葡萄糖40 g/L，蛋白胨 10 g/L，酵母粉 10 g/L，pH6.0±0.1；（4）乙酸乙酯提取物的制备：将步骤（3）制备的发酵液用医用纱布过滤，得到狭旋毛壳菌体，将狭旋毛壳菌体用乙酸乙酯提取，得到乙酸乙酯提取液，31~33℃下减压除去乙酸乙酯后得到乙酸乙酯提取物；（5）可皆霉素的制备：将步骤（4）制备的乙酸乙酯提取物用80～100目硅胶拌样后装柱，固定相为200~300目硅胶，以二氯甲烷－甲醇梯度洗脱，硅胶薄层层析检测，合并二氯甲烷‑甲醇的体积比为100：（2~4）的流份，31~33℃下减压除去二氯甲烷和甲醇，得可皆霉素。