一种建立肝细胞癌顺铂耐药细胞株的方法

摘要

本发明提供一种建立肝细胞癌顺铂耐药细胞株的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、取人肝癌细胞LM3细胞复苏后用DMEM培养液，于培养箱中培养；步骤二、取对数生长期LM3细胞种于24孔板中，分别加入0.1μmol/L、0.25μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L、2μmol/L、5μmol/L、10μmol/L顺铂，适时传代或换夜。以顺铂加入后细胞可以保持长期生长的最大浓度为最佳浓度。步骤三、寻找到最佳浓度为0.5μmol/L，后用最佳浓度长期刺激细胞4个月，得到肝细胞癌顺铂耐药细胞株。本发明得到的肝细胞癌顺铂耐药细胞株可用于发现肿瘤耐药标志物以及筛选和评估新型抗肿瘤药物等。

主权项

一种建立肝细胞癌顺铂耐药细胞株的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，取LM3细胞复苏后用DMEM培养液，于37℃，5％的CO₂培养箱中培养；步骤二，取步骤一中生长至对数生长期的所述LM3细胞种于培养孔中，分别加入0.1μg/L、0.25μg/L、0.5μg/L、1μg/L、2μg/L、5μg/L、10μg/L的顺铂，适时传代或换液，每次传代或换液时，均在各所述培养孔中相应加入上述浓度的所述顺铂，以所述顺铂加入后所述LM3细胞可以保持生长的最大浓度为最佳浓度；步骤三，使用所述最佳浓度的顺铂长期刺激LM3细胞，筛选到仍能快速生长的LM3细胞即为肝细胞癌顺铂耐药细胞株。