一种龙竹组培苗工业化生产快繁方法

摘要

本发明公开一种龙竹组培苗工业化生产快繁方法，以龙竹当年生枝条为外殖体，消毒后先用芽诱导培养基进行诱导培养得到侧芽，将其切下用增殖培养基进行增殖培养得到大量无性系植株，并进行壮苗培养，再将植株转接到生根培养基上进行生根培养，最后得到完整的龙竹无性系植株。然后用组合基质进行龙竹试管苗大棚练苗，最后将成活的竹苗进行大田实地栽培。本发明运用独特的试验方法和改良的培养基，克服了龙竹组培过程中消毒、增殖、生根困难以及试管苗遗传稳定性差的难题，使植物组织培养技术在大型丛生竹试管苗工业化生产领域得到更为广泛的运用，并且取得了技术性的进展，为竹类资源的开发利用提供了良好的基础技术支撑。

主权项

一种龙竹组培苗工业化生产快繁方法，其特征在于步骤如下：（1）外植体的采集和前期处理：采集生长状况良好健康无病虫害的一年生龙竹枝条，进行修剪去除次生枝叶，放置在4～8℃冰箱保存1～2天；然后按每个竹节一段将其削成小段，再削除竹节上的秆箨，并用纱布擦除枝秆表面的污垢，最后用无菌水洗净；（2）将洗好的龙竹枝条段在无菌条件下进行三次消毒处理：首先用浓度75%的乙醇擦洗后用无菌水冲洗干净；然后将龙竹枝条段投放到消毒瓶中浓度0.1～1%的升汞水溶液中进行第二次消毒10～20min，在此过程中要不断摇晃消毒瓶，使得消毒液能够很好的分散杀菌，再将龙竹枝条段投入浓度1.5～5%的次氯酸钠水溶液中进行第三次消毒，同样要摇晃瓶子；最后用无菌水冲洗3～5次；（3）腋芽的诱导：将经过消毒的龙竹枝条段插入芽诱导培养基中进行诱导培养，培养温度为25℃，先暗培养3～5天，然后再进行光照培养，光照强度为1000～1200Lx；所述的诱导培养基为1/2MS，其中含有6‑BA 5.0～10.0mg/L、2，4‑D 2.0～5.0mg/L、NAA 0.5～1.5mg/L、蔗糖10～20mg/L和琼脂3.5～5.0g/L；（4）丛生芽诱导培养：将龙竹枝条段在诱导培养阶段诱导出来的侧芽切割下，接种到丛生芽诱导培养基中进行光照培养，光照强度为1000～1200Lx，25℃条件下培养20～25天，从而诱导培养出大量的丛生芽；所述的丛生芽诱导培养基为3/4MS，其中含有6‑BA 2.5～5.5mg/L、KT1.0～2.0mg/L、NAA 0.5～1.5mg/L、蔗糖10～20mg/L和琼脂3.5～5.0g/L；（5）诱导生根培养：把丛生芽切割分成带2～3个小芽的小芽丛接种于诱导生根培养基上进行生根培养，光照强度为1000～1200Lx，25℃条件下培养25～35天，生根率为95%，所述的诱导生根培养基为1/2MS，其中含有6‑BA 0.1～0.5mg/L、NAA 1.5～5.0mg/L、IAA 1.5～3.0 mg/L、蔗糖10～20mg/L和琼脂3.5～5.0g/L；（6）练苗和大田栽培：把生根苗放置到室温下3～5天，洗净培养基，然后用1000倍稀释的多菌灵水溶液浸泡5～10min，再移栽到按质量比例为30%腐殖土、20%河沙和50%泥土的基质中，用遮光度为50～70%的遮阴网控光以保持土壤湿润，温度控制在23～28℃，待小竹苗长至15～20cm高时，移到苗圃中进行大田实地栽培。