| 摘要 |
本发明为一种双光子激光横断幼年斑马鱼脊髓的方法。选择出生后24h幼年斑马鱼，加入色素抑制剂，抑制色素的形成获得身体透明的斑马鱼。出生后第七天进行脊髓横断。实验方法：将幼鱼用麻醉剂进行麻醉，待幼鱼完全麻醉后，将幼鱼用8％的琼脂糖包裹固定在直径为5cm培养皿底部，在显微镜下可以看到其心脏跳动，固定好的幼鱼侧面向上。在双光子显微镜下，用波长为800nm、能量为45％的双光子激光切断幼鱼的脊髓。激光手术后可以在显微镜下看到明显端口，表明脊髓被完全横断。用手术刀片切开凝胶释放斑马鱼幼鱼。斑马鱼身体维持直线形并丧失了游泳能力，表明造模成功。术后将每条斑马鱼单独放入六孔板中单独饲养，进行实验研究。 |
