一种用青蒿生产乳铁蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种用青蒿生产乳铁蛋白的方法，包括以下步骤：a、改造并获得载体T202；b、改造并扩增乳铁蛋白基因；c、构建青蒿细胞中表达乳铁蛋白基因的重组质粒T202-Blf；d、用重组质粒T202-Blf转化农杆菌EHA105细胞；e、筛选阳性农杆菌EHA105菌株，并进行酶切鉴定；f、转化青蒿，获得阳性含乳铁蛋白的青蒿转化植株；g、实时定量PCR(qRT-PCR)鉴定乳铁蛋白的表达量。本发明采用的青蒿表达系统具有以下优点：根据青蒿的密码子偏好性，对乳铁蛋白基因的核苷酸序列进行了优化，保证了高效和稳定的mRNA转录、快速和准确的翻译以及较高的外源蛋白质积累；植物表达乳铁蛋白成本低、安全、经济效益好；表达的蛋白产品可直接用于添加，无须纯化。

主权项

一种用青蒿生产乳铁蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)改造载体T202；改造后的载体T202序列如SEQ ID NO.1所示；(2)构建青蒿细胞中表达改造后的乳铁蛋白基因的重组质粒T202‑Blf；重组质粒T202‑Blf的序列如SEQ ID NO.2所示；(3)用重组质粒T202‑Blf转化青蒿；(4)筛选阳性转基因青蒿植株，获得生产乳铁蛋白的青蒿植株。