生物荧光显微检测仪器

摘要

本发明提供的生物荧光显微检测仪器包括激发光照明单元、激发光和荧光隔离单元、反射单元、显微成像单元、荧光探测单元及控制单元。激发光照明单元的第一扩束镜及第二扩束镜之间且位于第一扩束镜的焦点处设有照明针孔，荧光探测单元的成像镜头和光电倍增管之间且位于成像镜头的焦点处设有成像探测针孔，有效提高了该仪器的横向分辨率；同时，在显微成像单元的筒镜与显微物镜之间设置环形光束整形组件，提高了该生物荧光显微检测仪器在轴向的分辨率。

主权项

一种生物荧光显微检测仪器，其特征在于，包括激发光照明单元、激发光和荧光隔离单元、反射单元、显微成像单元、荧光探测单元、控制单元及盖玻片；所述激发光照明单元包括激光光源、第一扩束镜、第二扩束镜；所述第一扩束镜及第二扩束镜之间设有照明针孔，且所述照明针孔位于所述第一扩束镜的焦点处；所述激发光和荧光隔离单元包括激发光滤色片、二色镜、荧光滤色片；所述反射单元为平面反射镜；所述显微成像单元包括中继透镜、筒镜、环形光束整形组件、显微物镜，所述环形光束整形组件包括设于所述筒镜及显微物镜之间的环形滤光片，所述环形滤光片具有将激光截止的内环区域和透射激光的环带区域，该内环区域和环带区域均可透射荧光；所述内环区域的半径不小于刚好能发生全内反射时所述显微物镜入瞳位置的临界半径；所述环带区域的宽度可调节；所述显微物镜为无穷远消像差型大数值孔径的浸油物镜；所述盖玻片和所述浸油物镜的油的折射率相同，进入所述显微物镜的环形光束在所述盖玻片和待观察对象所在的组织溶液的交界处发生全反射，所述环形光束在所述盖玻片和所述组织溶液的交界处形成隐失场，调整所述环带区域的宽度可以改变所述隐失场的分布深度；所述荧光探测单元包括成像镜头、光电倍增管，该成像镜头与所述光电倍增管之间设有成像探测针孔，所述成像探测针孔位于所述成像镜头的焦点处；待观察对象与所述照明针孔和成像探测针孔处于共轭位置上；所述光电倍增管可探测荧光，并将所述荧光转换成电信号；所述第一扩束镜、照明针孔、第二扩束镜、激发光滤色片、二色镜、反射单元、中继透镜、筒镜、环形滤光片及显微物镜依次沿始于所述激光光源的光轴线设置，且所述显微物镜、环形滤光片、筒镜、中继透镜、反射单元、二色镜、荧光滤色片、成像镜头、成像探测针孔及光电倍增管依次沿始于由待观察对象激发的荧光光轴线设置；所述控制单元与所述光电倍增管电性连接，用于采集所述电信号并生成待观察物质中一个点图像。