免疫球蛋白Ｇ的阿尔发2,6唾液酸绝对值之检测方法

摘要

免疫球蛋白G的阿尔发2,6唾液酸绝对值之检测方法，其中该免疫球蛋白G的阿尔发2,6唾液酸绝对值的检测方法系可直接利用血液、血浆、血清或培养液来测定免疫球蛋白G的阿尔发2,6的唾液酸量，改善知方法之不足，且本发明亦发现使用小鼠单株抗体免疫球蛋白G，由1000奈克/毫升之磷酸盐缓冲盐往下双倍稀释至15.625奈克/毫升作为唾液酸标准品之定量使用具有良好之效果。

主权项

一种免疫球蛋白G的阿尔发2,6唾液酸绝对值之检测方法，系包含以下步骤：步骤一：在酵素免疫测定盘内，每小格加入200奈克的接骨木凝集素(Sambucus nigra agglutinin lectin)溶解在100微升磷酸盐缓冲盐中(酸硷度为7.2)，并停放在摄氏4度冰箱中过夜；步骤二：以磷酸盐缓冲盐液加入0.5%体积的聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸脂(polyoxyethylene(20)sorbitan monolaurate)做为冲洗液共4次冲洗，每小格加入300微升之浓度1%牛血清白蛋白溶于磷酸盐缓冲盐液，在室温下置放两小时，以阻断非特异性粘连；步骤三：同样以上述步骤二之冲洗液冲洗该酵素免疫测定盘4次后，加入血浆、血清、血液或分离的免疫球蛋白在室温下置放两小时；步骤四：以上述步骤二之冲洗液冲洗该酵素免疫测定盘4次，每小格加入300微升之浓度1%的牛血清白蛋白溶于磷酸盐缓冲盐液，在室温下置放1小时；步骤五：以上述步骤二之冲洗液冲洗该酵素免疫测定盘4次，每小格加入100微升之稀释8000倍的辣根过氧物酶连结之山羊抗小鼠免疫球蛋白G抗体溶于磷酸盐缓冲盐液，置于室温下1小时；
步骤六：以上述步骤二之冲洗液冲洗该酵素免疫测定盘4次，每小格加入由四甲基联苯氨(tetramethyl benzidine)溶液和过氧化氢溶液同倍体积混合液100微升，在室温下置放10分钟后，再加入以0.5当量硫酸100微升以阻止反应继续；步骤七：经由酵素免疫分析仪以450奈米波长测定所有小格的读数；其中该检测方法所使用之标准品为小鼠单株抗体免疫球蛋白G，由1000奈克/毫升之磷酸盐缓冲盐往下双倍稀释至15.625奈克/毫升在室温下置放两小时。