昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法

摘要

本发明公开了一种昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法，将家蚕质型多角体病毒（BmCPV）的多角体基因（polyhedrin）以及目的蛋白基因分别构建至pFastBac Dual载体上的PH和P10启动子下面，通过重组获得同时表达多角体和目的蛋白的杆状病毒。本发明利用杆状病毒表达系统，同时将质型多角体蛋白基因和目的蛋白基因分别构建到pFastBac^TMDual载体的PH与p10启动子下，并在目的蛋白与信号肽之间引入柔性链接肽，通过与病毒骨架重组，获得重组杆状病毒。通过该单一病毒感染Sf9或Sf21昆虫细胞，直接可以在细胞内产生所需要的包裹型蛋白，并且这种重组型的病毒也同样可以获得扩增。

主权项

昆虫病毒多角体实现外源蛋白高效包裹的方法，其特征是：将家蚕质型多角体病毒BmCPV的多角体基因polyhedrin以及目的蛋白基因分别构建至pFastBac Dual载体上的PH和P10启动子下面，通过重组获得同时表达多角体和目的蛋白的杆状病毒；在目的蛋白基因前面加入81‑90bp H1定位信号序列以及6‑12个GGS柔性连接肽，GGS为甘氨酸‑甘氨酸‑丝氨酸；由H1信号肽与柔性连接肽构成的引导基因的序列为SEQ ID NO：2所述。