一种利用HPLC指纹图谱鉴定果蔬真伪的方法

摘要

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种利用HPLC指纹图谱鉴定果蔬真伪及农残含量的方法。本发明首先以培植过程中不使用任何农药、化肥、植物生长调节剂的果蔬作为标准样品，对其进行高效液相色谱测定，得到标准指纹图谱，然后利用“指纹图谱相似度评价系统的操作规范”软件，对标准样品和待测样品的指纹图谱进行匹配，求出标准样品与待测样品的相似度，进而确定待测果蔬真伪及农残含量，本发明所建立的HPLC色谱指纹图谱可对被测样品所有化学物质进行整体表征，以指纹图谱的形式，向人们提供被测样品的各种信息，突破了人们一直沿用的多指标的检测方法，具有稳定、精密度高、重现性好的特点。

主权项

一种利用HPLC指纹图谱鉴定果蔬真伪的方法，其特征在于，其具体步骤为：(1)在标准样品的原产地对标准样品进行培植，所述培植过程中不使用任何农药、化肥，追溯生长的全过程，以保证整个生长过程无任何污染；(2)将获得的标准样品洗净、绞碎；(3)准确称取绞碎的标准样品25.0g于锥形瓶中，加入50mL分析纯乙腈，高速匀浆2min，过滤到盛有5g氯化钠的具塞量筒中，剧烈震荡后静置30min；(4)用移液管取30mL上层乙腈层于圆底烧瓶中，在40℃条件下旋转蒸发至干，加入1.5mL色谱甲醇，涡旋溶解后，加入1mL水混匀；(5)将上述液体过0.22μm有机滤膜于进样小瓶中，得标准样品溶液，上HPLC‑PDA，测定HPLC标准指纹图谱；所述的HPLC标准指纹图谱的色谱条件为：仪器：HPLC‑Waters 2695，PDA–Waters 2996，色谱柱：TechMate C18‑ST，5μm，4.6×250mm，柱温：35℃，进样量：10μL，流速：1.0mL/min，波长：251nm，流动相为乙腈‑0.1％磷酸水溶液，梯度洗脱，洗脱程序为：0min→20min→40min→50min→55min，流动相中乙腈的体积百分比为6％→15％→24％→6％→6％；在此条件下分析标准样品溶液，得到标准样品指纹图谱；(6)对12批标准样品建立了HPLC指纹图谱，通过分析比较，确定标准样品共有特征峰；(7)用待测样品代替标准样品，重复上述步骤(2)‑(5)，得到待测样品指纹图谱；(8)将标准样品指纹图谱与待测样品指纹图谱匹配，利用软件数据处理，求出相似度，进行对比。