棉花纤维中苯丙烷类结构单体的检测方法

摘要

棉花纤维中苯丙烷类结构单体的检测方法，先采用巯基乙酸法提取出棉花纤维中的苯丙烷类化合物，再利用还原降解反应(DFRC)法分析巯基乙酸法提取的棉花纤维苯丙烷类化合物。该方法解决了棉花纤维中苯丙烷类化合物由于含量低其结构单体无法直接检测的问题，而且所提出的检测方法步骤简洁、条件温和、选择性强、准确率高。可用于正确的评价棉花纤维中存在的苯丙烷类结构单体。对通过调控棉花纤维苯丙烷类化合物生物合成从而改良棉花纤维品质的应用研究具有积极意义。

主权项

一种棉花纤维中苯丙烷类结构单体的检测方法，先采用巯基乙酸法将苯丙烷类化合物从棉花纤维中提取出来，再借助还原降解反应(DFRC)进行苯丙烷类结构单体的分析；其步骤具体为：(1)巯基乙酸法提取棉花纤维中的苯丙烷类化合物a.称取1.0g已清洗去可溶物质的棉花纤维，置于30mL血清瓶内，加入20mL 2M HCl后再加入3mL巯基乙酸，充分混匀后旋紧瓶盖，置于98℃水浴锅内轻缓震荡4h；反应完成后取出血清瓶置于冰上冷却20min，将反应液转至50mL离心管，12,000rpm，室温下离心15min，弃上清，残渣用20mL蒸馏水清洗3次；b.向离心管中的残渣中加入10mL 0.5M NaOH，混匀后室温下250rpm摇动10‑12h；随后12,000rpm，室温下离心15min，存上清液；c.重复步骤b；d.残渣再加10mL 2M NaOH，重复步骤b；e.将三次上清合并，加入6mL浓HCl，4℃下放置4h；f.12,000rpm，4℃，离心20min，弃上清；g.沉淀用10mL蒸馏水清洗2次，干燥后研磨成粉末备用；(2)苯丙烷类化合物衍生化后的还原降解反应(DFRC)a.乙酰溴衍生和苯丙烷类化合物溶解反应：将用巯基乙酸法提取的棉纤维苯丙烷类化合物置于30mL具Teflon内垫的血清瓶内，加5mL体积比为20∶80的AcBr∶acetic acid溶液，立即盖紧瓶盖，放置于水浴锅内，60℃下水浴3h，反应完成后将降解溶液转移至10mL称量瓶内，敞口放置在通风橱内将溶液快速吹干；b.还原裂解反应：吹干后的残余物溶解在3mL酸性还原介质中，加入约50mg锌粉，摇床上300rpm下轻缓晃动30min；混合物倒入含10mL饱和NH₄Cl和10mL CH₂Cl₂的分液漏斗中，混匀后用3％HCl调节pH至3，CH₂Cl₂萃取2次，萃取液混合后用无水MgSO₄干燥，过滤，减压蒸发至干；c.乙酰化过程：残余物中加1.5mL CH₂Cl₂、0.2mL吡啶、0.2mL乙酸酐，混匀密封后室温下乙酰化40min，减压蒸干，残余物用无水乙醇清洗至无吡啶味道，蒸干无水乙醇；d.标样的乙酰化：准确称取10mg松柏醇、15mg芥子醇分别加入0.5mL吡 啶溶解后，再分别加入0.5mL乙酸酐，充分混匀，室温下放置12‑16h，然后分别加入5mL无水乙醇，真空蒸干，反复用无水乙醇清洗至无吡啶的味道后将乙酰化产物做GC分析的标样；e.GC分析：残余物溶解在1mL CH₂Cl₂中，进行GC分析。