一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法

摘要

本发明公开了一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法，包括（1）菌种样品采集，（2）扩增培养，（3）筛选驯化菌种和（4）纯化菌种等四个步骤，本发明首先在市政污水厂的活性污泥和黑臭水体底泥里筛选出具有脱氮除磷的土著微生物，用黑臭水体的污水作为主要的碳源与能量，再加入其他菌种生长所需的营养元素，通过驯化得到来自本土环境中的具有脱氮除磷的复合菌。本发明培养出的菌种具有增殖快，对黑臭水体的脱氮除磷效果明显等特点，使用本发明得到的复合菌处理黑臭水体既避免了使用化学净水剂的二次污染，也不需要担心菌种的安全性，处理效率也远高于种植水生植物。

主权项

一种用于黑臭水体脱氮除磷复合菌的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)菌种样品采集：分别采集市政污水处理厂的活性污泥与黑臭水体的底泥，放入恒温箱中待用，温度为28℃～35℃；(2)扩增培养：在好氧条件下，向两种污泥样品中分别加入液体培养基进行恒温培养，温度为28℃～35℃，培养时间为2～3天；所述的液体培养基的配置比例为：1000mL培养基中加入K₂HPO₄0.0‑1.5g、MgSO₄·7H₂O 1‑3g、牛肉膏1‑3g、(NH₄)₂SO₄1‑2g、NaH₂PO₄·3H₂O 1‑2g、尿素0.2‑0.3g、FeSO₄·7H₂O 0.002‑0.003g、MnSO₄·7H₂O 0.003‑0.004g、ZnSO₄·7H₂O 0.003‑0.004g、CoSO₄·7H₂O 0.001‑0.002g、葡萄糖15‑16g，调pH值为7.0，并高压灭菌；(3)筛选驯化菌种：将两种污泥混合液按照1～3:1混合加入筛选驯化培养基中，在28℃～35℃温度下好氧振荡，2～3天为一个驯化周期，需要5‑8个驯化周期；每个驯化周期结束后，取5‑10mL培养液接种到新鲜的筛选驯化培养基中；所述的筛选驯化培养基的配置比例为：1000mL培养基中加入黑臭水体的污水50‑100g、K₂HPO₄1.5‑2.5g、NaH₂PO₄·3H₂O 1‑2g、MgSO₄·7H₂O 3‑4g、NH₄Cl 2‑3g、维生素B₁ 0.1‑0.2g，调pH值为7.0，并高压灭菌；(4)纯化菌种：将筛选好的菌种接种到活化富集培养基中，在28℃～35℃温度，培养2‑3天，离心处理，再用磷酸盐缓冲液清洗，再离心制成菌种悬浮液；所述的活化富集培养基的配置比例为：1000mL培养基中加入NH₄Cl 2‑3g、牛肉膏5‑6g、葡萄糖15‑16g、琼脂15‑16g，调pH值为7.0，并高压灭菌。