一种大菱鲆肝脏组织细胞体外构建方法及其应用

摘要

本发明提供一种大菱鲆肝脏组织细胞体外构建方法及其应用，其特征是以大菱鲆肝脏组织为实验材料，使用Ⅱ型胶原酶酶解法启动鱼类肝脏细胞的原代培养，并在24℃生化培养箱中使用添加有一定浓度胎牛血清和各种生长因子等营养成分的新型L-15复合培养基培养。经脂质体转染发现，本发明所提供的大菱鲆肝脏组织原代培养细胞可被报告质粒如pIRES2-EGFP成功转染。本发明具有方法简便易行、重复性好、成本低和细胞生长迅速的优点，可为鱼类营养代谢的分子细胞生物学研究提供有效的体外细胞模型。

主权项

一种细胞培养基，其特征在于，所述的培养基是添加有20％的胎牛血清、0.5％补体灭活的花鲈血清、10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子、10μg/L表皮样生长因子、1mmol/L丙酮酸钠、2mmol/L的L‑丙氨酰‑L‑谷氨酰胺的L‑15培养基。