一种从培育长春花中提取高纯度长春新碱的方法

摘要

一种从长春花中提取长春新碱的方法，属于一种生物技术领域。本发明针对目前我国长春花中长春花碱含量低，提取纯度未达到98％，提取率低于30％，降低了其工业化生产的价值，造成了很大的浪费，本发明提供了一种通过活性污泥、玉米秸秆、磷酸稀醇式丙酮酸等混合作为培养基质，对长春花进行培养，再喷洒混合液等，提高长春花中长春花碱含量，再将其处理后，盐水浸泡，发酵，再经浓缩，提纯得长春花碱的方法。本发明方法独特，通过检测得到通过培养长春花中长春花碱的含量提高了20～30％，提取得到的长春花碱的纯度达到98％以上，提取率达到55～60％。

主权项

一种从培育长春花中提取高纯度长春新碱的方法，其特征在于具体步骤为：（1）按质量百份比计，取50～55份活性污泥，20～25份40～60目玉米秸秆粉末，8～10份葡萄糖，4～5份磷酸稀醇式丙酮酸，8～10份浓度为80～100mg/L色氨酸以及1～2份茉莉酸甲酯放入容器中，搅拌均匀；（2）将上述所得的混合物放入发酵池中，温度设定为30～35℃，密封搅拌发酵5～7h去除发酵液，将发酵物作为培养基质，均匀铺在培养池中厚度为8～10cm，按每立方米种植2～4对真叶的长春花，移入培养池进行培养，保持温度为20～33℃，培养基质的含水量为20～35％，每隔1～2天喷洒混合液，其喷洒量为每棵长春花喷洒4～5mL混合液，所述混合液为按照每升质量分数为8％的盐酸溶液加入84g6‑糠氨基嘌呤均匀混合而成，待长春花结出花蕾时，拔出长春花，取其根部；（3）将上述去根后的长春花放入容器中，向其中加入质量分数为70～80％的氯化钠溶液浸没长春花，待长春花含水量为5～10％后将其取出，并用去离子水冲洗1～2次，然后放入风干机中进行风干，放入粉碎机中粉碎成40～50目颗粒；（4）把上述所得的粉末放入容器中，向其中加入质量分数为35～50％的硫酸溶液浸泡30～40min，然后再向其中加入硫酸溶液体积30～40％的碳酸二甲酯，以及粉末质量的10～15％的纤维素酶，搅拌1～2h，温度设定为50～55℃；（5）使用质量分数为30％的氨水调节上述溶液pH为6.5～7，降温至20～25℃，搅拌均匀过滤，向滤液中加入氨水体积0.3～0.5倍的二丙二醇二甲醚，以转速500～600r/min搅拌30～40min后，静置10～20min分层，取下层液，然后再向上层液加入氨水体积0.1～0.2倍的二丙二醇二甲醚，重复操作取下层液；（6）合并两次上述所取得的下层液，在温度为90～100℃，压力为100～200Pa下，旋转蒸发浓缩30～40min，回收二丙二醇二甲醚与氨水，然后将所得的浓缩液放入容器中，向其中加入浓缩液体积2～3倍的无水乙醇，温度降至4～6℃，搅拌直至无沉淀产生，过滤收集过滤物，并用乙醇冲洗1～3次，干燥即可得到长春新碱。