发明名称 一种利用趾甲提取DNA扩增三线闭壳龟线粒体全长的方法
摘要 本发明公开了一种利用趾甲提取DNA扩增三线闭壳龟线粒体全长的方法,含以下步骤:(1)选取三线闭壳龟的趾甲,预处理后,用MicroElute Genomic DNA Kit试剂盒提取三线闭壳龟DNA;(2)设计能覆盖三线闭壳龟线粒体全基因组的16对引物,以步骤(1)中提取获得的三线闭壳龟DNA为模板,利用16对引物进行PCR扩增,将PCR扩增产物进行测序和拼接后,首次扩增获得三线闭壳龟线粒体全长。该方法步骤简洁,成本低,属于非损伤性取样,能获得三线闭壳龟线粒体全序列。
申请公布号 CN103865921B 申请公布日期 2016.01.20
申请号 CN201410068690.4 申请日期 2014.02.27
申请人 中国水产科学研究院珠江水产研究所 发明人 朱新平;李伟;赵建;洪孝友
分类号 C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 广州知友专利商标代理有限公司 44104 代理人 宣国华
主权项 一种利用趾甲提取DNA扩增三线闭壳龟线粒体全长的方法,其特征是含以下步骤:(1)选取三线闭壳龟的趾甲,预处理后,用MicroElute Genomic DNA Kit试剂盒提取三线闭壳龟DNA;(2)设计能覆盖三线闭壳龟线粒体全基因组的16对引物,以步骤(1)中提取获得的三线闭壳龟DNA为模板,利用16对引物进行PCR扩增,将PCR扩增产物进行测序和拼接后,首次扩增获得三线闭壳龟线粒体全长;步骤(2)中所述的16对引物由以下序列所示的引物组成:SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6、SEQ ID No.7和SEQ ID No.8、SEQ ID No.9和SEQ ID No.10、SEQ ID No.11和SEQ ID No.12、SEQ ID No.13和SEQ ID No.14、SEQ ID No.15和SEQ ID No.16、SEQ ID No.17和SEQ ID No.18、SEQ ID No.19和SEQ ID No.20、SEQ ID No.21和SEQ ID No.22、SEQ ID No.23和SEQ ID No.24、SEQ ID No.25和SEQ ID No.26、SEQ ID No.27和SEQ ID No.28、SEQ ID No.29和SEQ ID No.30、SEQ ID No.31和SEQ ID No.32。
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