| 发明名称 | 一种酶活提高的谷氨酸脱羧酶突变体构建及其应用 | ||
| 摘要 | 本发明公开了一种酶活提高的谷氨酸脱羧酶突变体及其构建方法，属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.1所示的氨基酸的基础上，将第172位酪氨酸突变成半胱氨酸。本发明得到的突变体在大肠杆菌中表达，摇瓶发酵24h后酶活为28.6U/mL，突变酶活提高了81％，底物亲和力较原始酶降低53％，同时比酶活提高83％，在35℃下酶的半衰期由16h延长至24h。在大肠杆菌中表达该重组酶，并全细胞转化谷氨酸18h可得到283.8g/L的γ-氨基丁酸；在谷氨酸棒菌中表达该重组酶，并全细胞转化谷氨酸18h可得到126.7g/L的γ-氨基丁酸。本发明表明172位氨基酸残基对酶的催化作用和稳定性有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。 | ||
| 申请公布号 | CN105255849A | 申请公布日期 | 2016.01.20 |
| 申请号 | CN201510815792.2 | 申请日期 | 2015.11.23 |
| 申请人 | 江南大学 | 发明人 | 饶志明;张显;杨套伟;徐美娟 |
| 分类号 | C12N9/88(2006.01)I;C12N15/60(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/77(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P13/00(2006.01)I | 主分类号 | C12N9/88(2006.01)I |
| 代理机构 | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人 | 耿晓岳 |
| 主权项 | 一种谷氨酸脱羧酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。 | ||
| 地址 | 214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号 | ||