一种检测畜禽毛发中抗病毒药物残留量的方法

摘要

本发明涉及以超高效液相色谱-电喷雾串联质谱检测畜禽毛发中金刚烷胺、金刚乙胺和吗啉胍残留量的方法。

主权项

一种检测畜禽毛发中金刚烷胺、金刚乙胺和吗啉胍残留量的方法，其特征在于包括以下步骤：a. 取适量畜禽毛发试样，清洗并剪碎；b. 称取制备好的试样；c. 加入D15‑金刚烷胺标准工作液，0.2mol/L HCI溶液消解后用2.0%三氯乙酸水溶液+乙腈， 1:2 V/V，溶液提取，加入氯化钠分层；d. 提取液于60摄氏度下氮气吹干，用2%甲酸水溶液定容，待净化处理；e. 待净化液过MCX柱；f. 设定超高效液相色谱‑电喷雾串联质谱条件；g. 净化液供超高效液相色谱‑电喷雾串联质谱测定；h. 数据处理与分析；其中，畜禽毛发为猪毛，用自来水洗出猪毛可见杂质，毛发于1%SDS+5%吐温80+纯水，1：1：1，超声15分钟，蒸馏水冲洗干净，用滤纸吸干；将毛发50℃干燥，放干燥器中备用；用剪刀剪碎猪毛成l‑2 mm，称取毛发0.5g于50mL离心管中，加入D15‑金刚烷胺标准工作液50.0µL，0.2mol／L HCI溶液5 mL，混匀后65℃消解2小时，取出，加入8mL 2.0%三氯乙酸水溶液+乙腈，1：2，涡旋30 s，超声提取30min后加入2g氯化钠，涡漩混匀2 min，5000 r/min离心10 min，取上清液于另一管中，60℃下用氮气吹干后，加入3 mL2%甲酸水溶液溶解，溶解液加载至已依次用3 mL甲醇、3 mL水活化过的MCX柱中，再依次用3 mL2%的甲酸水溶液、3 mL甲醇淋洗，减压抽干，用3 mL5%的氨水甲醇溶液，其中百分比单位为体积比，洗脱；洗脱液在60℃下用氮气吹干后，用0.1%甲酸水溶液：甲醇=90：10的溶液1 mL溶解残渣，涡旋30 s，经0.22 mm滤膜过滤后，上机测定；设定液相色谱条件为：色谱柱：Eclipse Plus C18 ，RRHD 1.8 µm，2.1×100 mm；流动相A为0.1%甲酸水溶液；B为甲醇；梯度洗脱程序：0~3.0 min，2%~5%B；3.0~5.0 min，5%~90% B；5.0~5.1 min，90%B~2%B； 5.1~7.0 min，维持2% B；流速0.25 mL/min；柱温30℃；进样体积：5.0 µL；质谱条件：电离模式：电喷雾电离正离子模式，ESI +；检测方式：多反应监测MRM；毛细管电压：4 000 V；离子源温度TEM：325 ℃；干燥气温度：300 ℃；干燥气流量：15 L/min；雾化气压力：50 psi；鞘气温度：400 ℃；鞘气流量：12 L/min。